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目的研究Notch信号通路对人骨肉瘤细胞MG63增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为以及早、晚期成骨分化的影响。方法1.运用实时荧光定量PCR法检测Notch信号通路相关基因在正常人成骨细胞和不同恶性程度人骨肉瘤细胞中的表达差异;2.运用Notch信号通路经典抑制剂DAPT抑制MG63的Notch信号通路活性（DAPT,抑制Notch信号通路组）,运用重组腺病毒过表达Jagged1激活MG63的Notch信号通路活性（Ad-Jagged1,激活Notch信号通路组）,运用空载重组腺病毒作为腺病毒对照组（Ad-RFP组）,运用DMSO作为助溶剂对照组（DMSO组）,未作任何处理的MG63作为空白对照组（Control组）;3.运用实时荧光定量PCR法检验Notch信号通路抑制剂（DAPT,γ分泌酶抑制剂）和激活Notch信号通路（过表达Jagged1腺病毒）对人骨肉瘤细胞MG63的Notch信号通路关键基因的调控作用;4.运用CCK8法检测调控Notch通路后MG63的增殖能力;5.运用DAPI染色检测调控Notch通路后MG63的凋亡水平;6.运用划痕和Transwell法检测调控Notch通路后MG63的迁移和侵袭能力;7.运用碱性磷酸酶和茜素红染色法检测调控Notch通路后MG63的早期、晚期成骨分化能力;8.运用实时荧光定量PCR检测调控Notch通路后人骨肉瘤细胞MG63的分化抑制因子1（Id1）表达情况。结果1.RT-PCR检测结果显示Notch信号通路关键基因DLL1、Notch1、Jagged1、Hes1和Hey1基因在骨肉瘤细胞中异常高表达（P<0.05）;2.DAPT（γ-分泌酶抑制剂）可抑制Notch信号通路活性（P<0.05）,过表达Jagged1腺病毒可激活Notch信号通路活性（P<0.05）;3.抑制Notch信号通路可抑制MG63增殖、迁移、侵袭,诱导其凋亡（P<0.05）;激活Notch信号通路可促进MG63增殖、迁移、侵袭,抑制其凋亡（P<0.05）;4.抑制Notch信号通路可抑制MG63成骨分化（P<0.05）;激活Notch信号通路可促进MG63成骨分化（P<0.05）;5.抑制Notch信号通路后,人骨肉瘤细胞MG63的分化抑制因子（Id1）表达水平下降（P<0.05）;激活Notch信号通路后,人骨肉瘤细胞MG63的分化抑制因子（Id1）表达水平上调（P<0.05）。结论1.Notch信号通路在人骨肉瘤细胞中异常高表达;2.抑制Notch信号通路可逆转人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为,抑制其成骨分化;激活Notch信号通路可增强人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为,促进其成骨分化;3.在人骨肉瘤细胞MG63中,调控Notch信号通路可影响Id1表达水平。目的研究Notch信号通路联合Id1对人骨肉瘤细胞MG63增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为以及早、晚期成骨分化的影响。方法1.运用Western blot检测以下各分组MG63的Id1蛋白表达水平（未作任何处理的MG63作为空白对照组,DAPT处理MG63作为抑制Notch信号通路组,Ad-Jagged1处理MG63作为激活Notch信号通路组,Ad-si Id1处理MG63作为沉默Id1组,Ad-Id1处理MG63作为过表达Id1组,DAPT和Ad-si Id1联合处理MG63作为抑制Notch信号通路联合沉默Id1组,DAPT和Ad-Id1联合处理MG63作为抑制Notch信号通路联合过表达Id1组,Ad-Jagged1和Ad-si Id1联合处理MG63作为激活Notch信号通路联合沉默Id1组,Ad-Jagged1和Ad-Id1联合处理MG63作为激活Notch信号通路联合过表达Id1组）;2.运用CCK8、结晶紫染色法检测联合调控Notch通路与Id1后MG63的增殖能力;3.运用DAPI染色检测联合调控Notch通路与Id1后MG63的凋亡水平;4.运用划痕和Transwell法检测联合调控Notch通路与Id1后MG63的迁移和侵袭能力;5.运用碱性磷酸酶和茜素红染色法检测联合调控Notch通路与Id1后MG63的早期、晚期成骨分化能力;结果1.与对照组相比,抑制Notch信号通路组和沉默Id1组Id1蛋白表达水平下降（P<0.05）,激活Notch信号通路组和过表达Id1组Id1蛋白表达水平上升（P<0.05）;与抑制Notch信号通路组相比,抑制Notch信号通路联合沉默Id1组Id1蛋白表达水平下降,抑制Notch信号通路联合过表达Id1组Id1蛋白表达水平上升（P<0.05）;与激活Notch信号通路组相比,激活Notch信号通路联合沉默Id1组Id1蛋白表达水平下降,激活Notch信号通路联合过表达Id1组Id1蛋白表达水平上升（P<0.05）;2.抑制Notch通路或者沉默Id1可抑制MG63增殖、迁移、侵袭,诱导其凋亡;与单独抑制Notch通路相比,抑制Notch通路联合沉默Id1可进一步抑制MG63增殖、迁移、侵袭,诱导其凋亡,抑制Notch通路联合过表达Id1可促进抑制MG63增殖、迁移、侵袭,抑制其凋亡（P<0.05）;激活Notch信号通路或者过表达Id1可促进人骨肉瘤细胞MG63增殖、迁移、侵袭,抑制其凋亡;与单独激活Notch通路相比,激活Notch通路联合沉默Id1可抑制MG63增殖、迁移、侵袭,诱导其凋亡,Notch通路联合过表达Id1可进一步促进MG63增殖、迁移、侵袭,抑制其凋亡（P<0.05）;3.抑制Notch信号通路可抑制MG63成骨分化,但沉默Id1或者抑制Notch信号通路联合沉默Id1可促进MG63成骨分化,其中以抑制Notch信号通路联合沉默Id1组成骨分化能力最强（P<0.05）;激活Notch信号通路可促进MG63成骨分化,与单独激活Notch信号通路相比,激活Notch信号通路联合沉默Id1可促进MG63成骨分化,激活Notch信号通路联合过表达Id1可抑制MG63成骨分化（P<0.05）。结论1.Notch通路联合Id1可影响人骨肉瘤细胞MG63的恶性生物学行为及成骨分化;2.抑制Notch通路联合沉默Id1可逆转人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为,促进其成骨分化。