PFDoA和PFHxA对斑马鱼幼鱼甲状腺干扰效应的研究

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本文以两种广泛使用的全氟化合物——全氟己酸(Undecafluorohexanoic Acid,PFHxA)和全氟十二酸(Perfluorododecanoic acid,PFDoA)为研究物质,选择模式生物斑马鱼为研究对象,从内分泌干扰角度,探讨了它们的毒性效应和具体的作用机制。首先,本研究从内分泌干扰的角度,揭示了两种全氟化何物PFDoA和PFHxA暴露96 h之后对斑马鱼幼鱼的甲状腺激素水平以及下丘脑-垂体-甲状腺(hypothalamic-pituitary-thyroid,HPT)轴相关基因和蛋白表达的影响,进而明确了PFDoA和PFHxA对甲状腺系统的毒性作用及其机理。此外,从生长发育表观指标、基因和蛋白的表达以及激素水平的变化进一步比较了长链PFDoA和短链PFHxA对斑马鱼胚胎发育毒性及内分泌干扰效应的的异同之处。主要研究结果如下:(1)暴露不同浓度的PFDoA(0、0.24、1.2和6 mg/L)96 h后,斑马鱼生长发育受阻,孵化率、心率和体长显著降低,畸形率和死亡率明显升高。同时斑马鱼幼鱼还出现脊柱弯曲、心包囊水肿等致畸现象。6 mg/L的暴露组显著抑制了斑马鱼体内四碘甲状腺原氨酸(tetraiodothyronine,T4)和甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)的分泌。与此同时HPT轴的相关基因的表达模式也发生了明显的变化。因此,PFDoA可能是通过调节HPT轴上的重要基因的表达进而干扰甲状腺激素的分泌,从而影响斑马鱼胚胎和幼鱼的早期发育。且对于不同暴露浓度,具有显著的剂量-效应关系。(2)暴露不同浓度的PFHxA(0、0.48、2.4和12 mg/L)96 h后斑马鱼生长发育同样受阻,孵化率、心率和体长明显降低,畸形率和死亡率显著升高。同时幼鱼出现尾部变形、脊柱弯曲和心包囊水肿等致畸现象。暴露组显著抑制了幼鱼体内T4的分泌,却诱导了T3含量的升高。同时HPT轴的相关基因的表达模式也发生了明显的变化。因此,PFHxA也可能通过调节HPT轴上的重要基因的表达进而干扰甲状腺激素的分泌,从而影响斑马鱼胚胎和幼鱼的早期发育。且对于不同的暴露浓度,具有显著的剂量-效应关系。(3)结果显示,PFDoA对斑马鱼幼鱼的畸形率和体长的影响尤其显著,其急性毒性强于PFHxA。此外,在斑马鱼早期发育过程中,crh,trh和tshβ的分泌与甲状腺激素的分泌途径密切相关,被视为HPT轴上重要的调节因子。虽然PFDoA和PFHxA对这三种重要调节因子的作用是一致的,却引起了不同的甲状腺激素水平变化,进而产生不同的内分泌干扰效应。
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