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本文用产耐热肠毒素(ST)的大肠杆菌阳性菌株对小鼠攻毒,确定了小鼠腹泻的最佳模型,通过动物试验筛选出治疗大肠杆菌耐热肠毒素病的方剂,并通过ST和吴茱萸汤对体外培养的肠道粘膜微血管内皮的影响,探讨ST对微血管内皮细胞损伤机制,并探讨了吴茱萸汤对肠道粘膜微血管内皮细胞分泌功能的影响。可以为进一步研究中药方剂的筛选和中药防治大肠杆菌病提供技术和理论基础。结果如下:
1.采用组织块贴壁法成功培养出大鼠乳鼠肠粘膜微血管内皮细胞,并进行了传代培养。2.成功建立了小鼠的腹泻模型,为中药方剂的筛选奠定了基础。并确定了半数致死量为0.2ml/10g,小鼠体重控制在16~18g。
3.根据大肠杆菌引起小鼠腹泻的临床症状组了20个方剂,并进行了中药方剂的筛选,最后确定吴茱萸汤为最佳的治疗方剂。
4.ST刺激肠粘膜微血管内皮细胞以后,FN与sICAM-1分泌量下降,提示ST对肠粘膜微血管内皮细胞损伤主要引起NO升高和FN与sICAM-1下降,导致微血管内皮细胞的连接性降低。
5.吴茱萸汤作用于微血管内皮细胞,可以抗ST损伤肠粘膜微血管内皮细胞。6.0.1μg/ml可作为ST致伤肠粘膜微血管内皮细胞的模型剂量,参考作用时间为1-9h。7.80μg/ml可以作为中药抗ST损伤肠粘膜微血管内皮细胞的剂量。