目的：应用细胞疗法能够有效的促进难治性糖尿病皮肤创伤的愈合，但愈合后皮肤瘢痕的形成和皮肤附件的缺失等问题目前尚未得到解决。探索使用胚胎皮肤细胞（ESkC）是否具有修复难治性糖尿病皮肤创伤的潜能。方法：在糖尿病小鼠背部制造一个圆形全层皮肤缺损，将经过荧光染料CM-DIL标记的ESkC移植进入伤口。手术后第4、7、11、14天记录伤口面积。术后第1、2、3周在小鼠背部获取组织样本，组织样本制作成切片后，通过免疫组织化学的方法检测TGF-β1、TGF-β3、VEGF和CD31标志物在组织中的表达情况。结果：经过ESkC治疗的糖尿病小鼠伤口在术后1周时，移植的细胞在伤口处形成了新的皮肤，与此同时，未经治疗的对照组伤口由痂皮覆盖。使用ESkC治疗的糖尿病小鼠在表皮再生、肉芽组织厚度和血管形成方面的组织学评分均明显高于未经治疗的对照组小鼠（p<0.05）。CM-DIL和CD31的荧光染色结果说明ESkC参与了组织的再生、毛囊的形成和血管形成。ESkC治疗组的TGF-β1和VEGF的表达在术后1周时非常显著，但在第2周时，组织中这两种因子的表达量下降。TGF-β3在术后1周时在组织中几乎没有表达，但在术后第2周，ESkC治疗组中的毛囊结构周围TGF-β3因子表达明显增强。结论： ESkC具有在糖尿病皮肤伤口中形成再生皮肤修复皮肤缺损的能力，并且能够在再生皮肤中恢复毛囊附属器的生长。