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肌肉是重要的动物产品之一，由不同类型的肌纤维组成，肌肉中不同类型肌纤维的组成比例决定了肉产品品质的优劣。肌纤维类型组成受到许多遗传因子的调控，长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）是其中重要的一类。LncRNA是一类大于200nt且不具有编码潜能的RNA，在生命体发生过程中发挥重要调控作用。本研究在关中黑猪中克隆并鉴定了Ⅱ型肌球蛋白重链（myosin heavy chain，MyHC）基因座的天然反转录本MyHCⅡA/X-AS lncRNA，并初步探究了其对猪肌肉生成过程中的调控作用。 本文首先通过生物信息学软件结合RACE等实验克隆得到MyHCⅡA/X-AS lncRNA；随后检测该lncRNA在关中黑猪不同组织中的表达、亚细胞定位及与基因座基因表达相关性；随后检测MyHCⅡA/X-AS对肌卫星细胞增殖分化的作用；最后探究该lncRNA通过与miR-130b互作调控MyHC IIx表达，从而调控不同肌纤维类型的组成。获得主要结果如下： 1.通过RT-PCR和在线数据库blast，检测到MyHCⅡA/X的反义链的表达，并命名为MyHCⅡA/X-AS，该转录本位于猪12号染色体，序列大小约4~5kb；通过qPCR检测，MyHCⅡA/X-AS lncRNA在肌肉组织中表达水平最高；核质分离RNA和FISH检测，该lncRNA主要存在于关中黑猪骨骼肌细胞质中；半衰期检测结果显示，MyHCⅡA/X-AS lncRNA稳定性高于MyHCⅡx；MyHC IIA/X-AS lncRNA随着成肌分化,表达量逐渐升高，且在猪生长后期也呈表达上升趋势；相关性表明MyHCⅡA/X-AS lncRNA的表达模式更接近快肌表达基因MyHCⅡx。 2.在分离的猪肌卫星细胞中用siRNA抑制MyHCⅡA/X-AS lncRNA的表达，相对于对照组，细胞增殖相关基因Cyclin E、Cyclin D、PCNA的表达显著上调（P<0.05），cck-8检测细胞活力显著增加，EdU检测增殖阳性细胞数目显著增加（P<0.05）；流式结果显示处理组的S期细胞数目显著高于对照组（P<0.05）。此外，MyHCⅡA/X-AS lncRNA的表达被抑制后，肌细胞分化相关基因MyHC、MyoG和MyoD的表达降低（P<0.05），免疫荧光结果显示肌卫星细胞分化和融合指数显著降低（P<0.05）。 3.在线软件预测MyHCⅡA/X-AS lncRNA有miR-130b的吸附位点，双荧光素报告载体系统验证这一结果；在肌卫星细胞中过表达miR-130b后，肌肉分化标志基因MyHC、MyoG表达显著降低（P<0.05），免疫荧光结果显示过表达组肌管数目显著低于对照组，多核肌管占总肌管数目比例降低（P<0.05），揭示该miRNA抑制肌细胞的分化和融合能力。 4.通过多个在线软件预测miR-130b的靶基因，求交集共得584个靶基因，KEGG及GO功能分析筛选得到和成肌分化相关靶基因MyHC IIx，双荧光素报告载体系统实验，验证了miR-130b与MyHC IIx存在互作。在肌纤维类型不同的背最长肌和半腱肌中检测MyHCⅡA/X-AS/miR-130b/MyHC IIx的表达，MyHCⅡA/X-AS和MyHC IIx在快肌中的表达显著高于慢肌，miR-130b则相反；表达相关性分析结果显示MyHCⅡA/X-AS和MyHC IIx表达正相关，与miR-130b表达负相关；在肌卫星细胞中抑制MyHCⅡA/X-AS lncRNA和过表达miR-130b后显著抑制快肌相关基因的表达并促进慢肌相关基因的表达（P<0.05）。 综上所述，MyHCⅡA/X-AS lncRNA主要存在于关中黑猪骨骼肌的细胞质中，稳定性较高且与基因座基因表达相关；MyHCⅡA/X-AS lncRNA可以吸附miR-130b，miR-130b调控肌卫星细胞的生长过程；MyHCⅡA/X-AS/miR-130b/MyHC IIx参与不同肌纤维类型组成的调控。研究结果为肌肉发育相关lncRNA的探索提供了研究基础，也为猪肉品质性状选育提供了理论依据。