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纺锤体极体(spindle pole body, SPB)作为酵母细胞的微管组织中心,它在细胞分裂及细胞遗传稳定性的维持过程中起着极其重要的作用,是细胞生物学领域热门的研究课题。Sfi1p是最新发现的酿酒酵母SPB的蛋白组分,对该蛋白功能及作用机制的探索,将有助于解决SPB研究过程中重要的科学问题,同时为其在高等真核细胞中同源蛋白的研究提供有用的指导。本论文通过构建SFI1温度敏感突变菌株,探索了Sfi1p蛋白在酿酒酵母产孢过程中的功能。通过错误倾向PCR,构建了SFI1温度敏感突变等位基因sfi1-778和sfi1-791。采用基因的等位置换法,将sfi1-778和sfi1-791整合至野生型酵母菌株W303-1A的染色体,所获突变株命名为LJ778和LJ791。通过HO质粒法将LJ778和LJ791转变为纯合二倍体菌株,分别命名为LJ778D和LJ791D。为考察突变株LJ778和LJ791的在限制性温度下的细胞表型,对细胞微管结构与核分布情况进行了荧光显微观察。观察结果显示,在限制性温度下,大部分细胞的芽体异常变大,细胞核不能正常分离而停滞于芽颈处或母细胞中随机位置;90%的大芽细胞不能装配形成有丝分裂纺锤体,而形成单极纺锤体。这些现象均表明,在限制性温度下,LJ778和LJ791的细胞周期被停滞在G2/M期,与SFI1基因缺失的菌株具有非常类似的细胞表型。对突变株LJ778D和LJ791D进行了产孢实验,分析了突变株的产孢效率和孢子组成情况,分析结果表明,突变株的产孢效率低于野生型菌株,并且在产孢过程中主要形成异常孢子。通过该研究发现,Sfi1p在酵母产孢过程中具有重要的功能,该功能的丧失可能会造成酵母细胞减数分裂过程缺陷或孢子形成过程缺陷,或者造成两种缺陷的同时发生,从而导致菌株产孢效率降低和异常孢子含量的显著升高。