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目的初步探讨黄荆子乙酸乙酯提取物(Evn-50)对体外培养的人鼻咽癌CNE-1细胞株增殖的影响,探讨黄荆子乙酸乙酯提取物在鼻咽癌药物治疗中的应用价值,为其临床应用提供初步的理论依据。方法以人鼻咽癌细胞株CNE-1为研究对象,将不同溶度(0、0.625、1.25、2.5、5、10ug/ml)黄荆子乙酸乙酯提取物作用CNE-1细胞后,用CCK-8法观察不同溶度(0、0.625、1.25、2.5、5、10ug/ml)黄荆子乙酸乙酯提取物作用不同时间(24h、48h和72h)后CNE-1细胞的增殖变化,并计数药物作用的IC50值,用于后续实验;将所选择药物浓度作用CNE-1细胞不同时间(24h、48h和72h)后,用流式细胞仪检测法测定黄荆子乙酸乙酯提取物作用不同时间后细胞的增殖和周期情况;采用RT-PCR和Western blotting检测黄荆子乙酸乙酯提取物作用不同时间后,CNE-1细胞内细胞周期相关蛋白p27和CDK2的表达情况。结果1. CCK-8比色法结果显示:黄荆子乙酸乙酯提取物对CNE-1细胞增殖有显著的抑制作用,并且呈现出时间和剂量依赖性;其IC50值为2.5ug/ml。2.流式细胞检测法结果显示:用2.5ug/ml黄荆子乙酸乙酯提取物处理CNE-1细胞不同时间后,CNE-1细胞的增殖受到明显抑制;G0/G1细胞比例明显增加,而S/G2/M期细胞明显减少,呈时间依赖性。3. RT-PCR结果显示:用2.5ug/ml黄荆子乙酸乙酯提取物处理CNE-1细胞不同时间后,CNE-1细胞中G1-S期抑制蛋白p27mRNA表达增高,而G1-S期促进蛋白CDK2mRNA表达降低,呈时间依赖性。4. Western blotting结果显示:用2.5ug/ml黄荆子乙酸乙酯提取物处理CNE-1细胞不同时间后,CNE-1细胞中G1-S期抑制蛋白p27蛋白表达增高,而G1-S期促进蛋白CDK2蛋白表达降低,呈时间依赖性。结论1.黄荆子乙酸乙酯提取物(Evn-50)具有明显抑制CNE-1细胞增殖的作用,其抑制作用呈时间-剂量依赖性。2.黄荆子乙酸乙酯提取物抑制CNE-1细胞增殖可能与通过阻断细胞周期(G1-S期)进展有关。3.黄荆子乙酸乙酯提取物抑制细胞增殖可能与其上调G1-S期抑制蛋白p27和下调G1-S期促进蛋白CDK2表达有关。