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目的: 研究基质金属蛋白酶-9及其抑制物-3在人正常月经周期不同时期子宫内膜的表达特点及IL-1β、TNF-α对离体培养的子宫内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3蛋白的影响,初步探讨MMP-9/TIMP-3在胚胎着床过程中的作用及其表达的调控机制。 方法: 1.人的子宫内膜组织增殖中晚期13例、分泌早期10例、分泌中期17例及月经前期15例均取自正常生育的妇女,年龄22~35岁。 2.采用免疫组化方法在蛋白水平检测MMP-9和TIMP-3在人不同时期子宫内膜组织中的表达特点及定位。 3.原代培养人分泌中期子宫内膜细胞,利用粘附式细胞仪,采用间接免疫荧光法检测IL-1β及TNF-α对内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3的影响。 结果: 1.在人整个月经周期子宫内膜细胞均有MMP-9和TIMP-3蛋白表达,MMP-9和TIMP-3蛋白主要定位于子宫内膜基质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞。 2.与增殖中晚期、分泌早期相比,分泌中期子宫内膜表达MMP-9和 T侧习蛋白特异性增高。 3与空白对照组相比,在几-lfi(50~1000u/tnl)的作用下原代培养的分泌中期子宫内膜细胞MMP习蛋白表达量显著升高O<0刀5**IMP习蛋白表达量显著降低…<0.05)。 4与空白对照组相比,在 TNF-a(50~1000u/ml)作用下,内膜细胞MMP习蛋白表达量显著降低…<0刀5Xn*卜3蛋白表达量变化不显著(P>0刀5)。 结论: 1.MMP习和 TIMPS蛋白主要由子宫内膜基质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞分泌,提示MNl,-9/TIMP.3,参与子宫内膜细胞的生长、分化及月经来潮的发生的调节。 2.MMP习和TIMP习蛋白在整个月经周期内膜细胞中均有表达,与增殖中晚期及分泌早期子宫内膜相比,分泌中期子宫内膜细胞特异性高表达MMP习和 TM3蛋白,提示MMP习/’I’M3相互作用可能是参与胚胎着床调控的重要因素之一。 3.IL刁 p可以促进 MNl>习蛋白的分泌,而抑制 TIMP刁蛋白的分泌,从而在MMP-9/TJMP-3相互作用中使MMP-9蛋白占主导地位,促进了细胞外基质的降解,有利于绒毛滋养层细胞的植入。” 4.TNF Q抑制MMP.9蛋白的分泌,但不影响TIMP-3蛋白的表达,攸TIMP3蛋白在MMP-9/TIMP-3相互作川中I‘f忧势,抑制MMP-9蛋白对细胞外基质的过分降解,避免了绒毛滋养层细胞的过度侵入。提示在胚胎着床过程中,MMP-9/TINrp.3蛋白对细胞外基质的降解可能受到细胞因子h.lp及TNF-口的调节。