论文部分内容阅读
目的观察人结肠癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)在体内对结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响,以探讨其在结肠癌侵袭转移中的作用。方法1、采用胶原酶消化法原代培养人结肠CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs);2、对第3代人结肠CAFs和NFs通过形态学观察和免疫细胞化学染色方法进行鉴定;3、BALB/c裸鼠随机分组,将CAFs和NFs分别与结肠癌LoVo细胞按浓度为1×107个/ml以1:1比例混合,以单独注射LoVo细胞组为对照组,通过皮下注射和脾脏注射的方法建立皮下移植瘤模型和肝转移模型,比较三组间皮下移植瘤的生长速度及肝转移率之间的差异;4、采用免疫组化S-P法检测皮下移植瘤标本中CD31标记的微血管密度(MVD)以探讨CAFs对肿瘤血管生成的影响。结果1、免疫细胞化学染色结果显示NFs中FAP、FSP、Desmin均为阴性表达;CAFs中除Desmin外,FAP与FSP均为阳性表达;2、皮下移植瘤生长曲线显示CAFs+LoVo组肿瘤生长速度和体积明显大于NFs+LoVo组和LoVo组,差异具有统计学意义(P<0.05);3、皮下移植瘤CD31免疫组化染色显示CAFs+LoVo组MVD计数为(11.16±2.44)个,NFs+LoVo组MVD计数为(7.36±1.52)个,LoVo组MVD计数为(6.08±1.41)个,CAFs+LoVo组MVD计数明显多于NFs+LoVo组和LoVo组,NFs+LoVo组MVD计数多于LoVo组,差异均具有统计学意义(P<0.05);4、肝转移模型中CAFs+LoVo组肝转移率为80%,明显高于NFs+LoVo组(40%)和LoVo组(20%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1、采用胶原酶消化法能够较快培养出原代成纤维细胞;2、人结肠CAFs对结肠癌肿瘤血管形成具有促进作用;3、人结肠CAFs能够促进结肠癌的侵袭和转移。