论文部分内容阅读
从山西汾阳混交林土壤以及山西五台山油松根部土壤中分离得到两株能在菌核内积累类胡萝卜素的汤姆青霉PT95和Q1菌株,并对两株菌株的菌核分化和类胡萝卜素代谢进行了初步研究。在实验室的前期工作基础上,本课题设计了不同的氧胁迫和富硒培养条件,分析氧胁迫和硒对PT95和Q1菌株菌核分化、菌核生物量、菌核中类胡萝卜素、抗坏血酸(ascorbic acid)和硒(selenium,Se)含量以及对两株菌株菌核的抗氧化性的影响。 以PDA和MEA培养基作为基础培养基,分别研究了CuSO4和H2O2导致的氧胁迫对汤姆青霉PT95和Q1菌株菌落形态、菌核分化、菌核形态和菌核生物量的影响。对照条件下PT95菌株菌核出现的时间比Q1菌株的晚1天。在CuSO4和H2O2导致的氧胁迫条件下,随着CuSO4和H2O2浓度的升高,两株菌株渗出液出现的时间、菌核出现的时间以及菌核成熟的时间都提前了1-3天,且 Q1菌株成熟的时间要比PT95菌株晚1-3天。在不同的氧胁迫条件下,两株菌株的菌落组成基本由菌核组成,而没有分生孢子和菌丝体的形成。PT95和Q1菌株的菌核生物量与氧胁迫呈一定的正相关性,氧胁迫越强,PT95和Q1菌株形成的菌核生物量越高。研究结果表明在氧胁迫条件下,汤姆青霉PT95和Q1菌株能形成大量的菌核来度过不良环境。 以PDA和MEA培养基作为基础培养基,分别研究了CuSO4和H2O2导致的氧胁迫对汤姆青霉PT95和Q1菌株菌核中的类胡萝卜素含量、抗坏血酸含量、总酚含量以及抗氧化性的影响。在低氧胁迫条件下,两株菌株菌核中的类胡萝卜素含量、抗坏血酸含量、总酚含量较高,菌核乙醇提取物的 DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力以及还原能力等非酶抗氧化性较强。说明在低氧胁迫条件下,PT95和Q1菌株可以通过产生非酶抗氧化物质来度过不良环境;而在高氧胁迫条件下,机体产生的非酶抗氧化物质不足以保护自身,就通过分化形成更多的菌核来帮助菌株度过不良环境,以期达到保护机体的目的。 同时,以PDA和MEA培养基作为基础培养基,分别研究了亚硒酸钠(Na2SeO3)和硒代蛋氨酸(SeMet)对汤姆青霉PT95和Q1菌株菌核分化、硒含量和抗氧化性的影响。添加了Na2SeO3和SeMet的PDA培养基不利于PT95和Q1菌株菌核的分化,而添加了Na2SeO3和SeMet的MEA培养基则较有利于PT95和Q1菌株菌核的分化。在MEA培养基中,随着Na2SeO3和SeMet浓度的提高,两株菌株渗出液出现的时间、菌核出现的时间以及菌核成熟的时间都延迟了。与对照比较,培养基中添加硒后两株菌株菌核的类胡萝卜素含量显著提高,且抗坏血酸含量也得以提高,但总酚含量没有提高;菌核提取物的还原能力提高,但亚铁离子螯合能力和 DPPH自由基清除能力没有提高。通过对菌核内硒含量的测定,发现硒可以在PT95和Q1菌株菌核内积累。在 MEA培养基上,PT95菌株菌核的硒含量与培养基中的 Na2SeO3和SeMet浓度呈显著的正相关性,Q1菌株菌核的硒含量与培养基中的SeMet浓度呈显著的正相关性,但与培养基中的 Na2SeO3浓度呈弱的正相关性。为了使菌核的硒含量得以提高,采用正交试验设计对PT95和Q1菌株菌核的富硒培养条件进行了优化,获得了两株菌株富硒培养的最适培养基:SeMet15μg/mL、葡萄糖13.33mg/mL、麦芽膏23.33mg/mL,蛋白胨1 mg/mL,琼脂20 mg/mL。