低剂量亚硝酸钠对失血性休克大鼠肠屏障功能的影响

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目的(1)通过对肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)的含量、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的含量,及肠粘膜屏障完整性的病理学观察和评分,探讨失血性休克大鼠的复苏过程中,在亚硝酸钠的参与下,是否可以对肠粘膜屏障的功能起到保护作用。(2)通过测定失血性休克大鼠肠粘膜中一氧化氮(nitric oxide, NO)的含量变化,观察亚硝酸钠对肠粘膜的作用是否与NO的含量有关。方法清洁级健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠40只,随机分为4组。体重200~250g,每组十只:即假手术组(S组)、失血性休克组(HS组)、亚硝酸钠组(NI组)、酚妥拉明组(PI组)。肝素化大鼠0.1mg/kg,暴露左侧颈总动脉并插管,待血压稳定后,经颈动脉放血(0.5ml/min)诱导休克,10min达到休克状态,休克的标准为平均动脉压(mean artery pressure, MAP)维持在35~40mm Hg之间,若MAP低于此水平,则回输自体血,若MAP高于此水平,继续放血,维持休克状态60min,放出的自体血回收,常温保存。经股静脉首先回输自体血进行复苏,若输入自体血后,血压不能维持在理想水平,则加用生理盐水复苏,速度均为0.2ml/min,20min复苏结束,并维持MAP在休克前的80%。NI组、PI组分别于复苏后10min给予药物干预亚硝酸钠(4.8mmol)酚妥拉明(0.123mg),假手术组动物除不放血和输液外,其他处理与失血性休克组相同。复苏2h后,处死大鼠,取肠组织。肠组织粘膜在光镜下对进行分析、评分。使用免疫组织化学法测定肠组织TNF-α的含量,制备组织匀浆测定MPO、NO的含量。结果与S组相比,HS组肠黏膜破坏严重,组织损伤评分高,TNF-α、MPO和NO含量增高(P<0.05);与HS组相比,NI组和PI组损伤程度略轻于HS组,并且TNF-α、MPO含量下降,NO含量增高(P<0.05),其中NI组损伤程度最轻,NO含量最高(P<0.05);与HS组相比,PI组的NO含量无明显差异。结论(1)失血性休克后,可引起肠道炎症反应,肠粘膜屏障损伤。(2)大鼠肠道炎症反应的引起及屏障的破坏可能与TNF-α及中性粒细胞增多有关。(3)复苏过程中,若使用亚硝酸钠,可使肠道炎症反应减轻,肠道屏障功能改善,这些作用与NO含量增高、TNF-α减低、中性粒细胞减少有关。
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