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层层自组装技术(Layer-by-Layer self-assembly,LBL)作为一种重要的薄膜制备技术,由于其简单的操作过程,温和的自组装环境而被广泛应用于生物医学领域。本文采用具有良好生物相容性的聚天冬氨酸(PASP)为聚阴离子电解质,聚烯丙基胺盐酸盐(PAH)和聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)为聚阳离子电解质,利用层层组装技术分别构筑了甲氨蝶呤二钠盐(MTX)和盐酸柔红霉素(DNR)的单药物负载体系及MTX、DNR双药物共同负载体系,并通过紫外-可见分光光度计(UV-vis)对各体系中药物的负载与缓释影响因素、药物负载与缓释性能进行探究,然后通过原子力显微镜(AFM)对缓释前后的层层组装膜进行表征和分析,最后考察了抗癌药物负载体系缓释液的体外抗癌效果。具体内容如下:首先,基于静电引力制备前体复合物PAH-MTX,以PASP、PAH-MTX为构筑基元层层组装制备(PASP/PAH-MTX)*n,得到MTX单药物层层组装负载体系,并对MTX的负载及缓释性能进行研究。结果表明:PASP与PAH-MTX的最适p H值分别为4.0和7.5,此条件下MTX负载效果达到最佳;在层层组装过程中,提高聚电解质浓度有利于增大载药量,延长药物释放时间;随着组装周期数的增加,膜内MTX的负载量呈先指数型增长,后线性快速增长模式;较高的组装周期数可获得较大的载药量及较长的药物释放时间。此外,基于静电引力制备阴离子型聚电解质复合物PASP-PAH,利用层层组装技术制备复合物空白膜(PASP-PAH4.0/PAH7.5)*n,完成了膜内MTX的后扩散负载,成功制备MTX层层组装膜后扩散负载体系。对此后扩散负载体系中MTX的负载与缓释性能进行研究,结果表明:MTX在层层组装膜(PASP-PAH4.0/PAH7.5)*16内5 h后扩散负载饱和,载药量2.4 mg,释放时间15 h。然后,基于静电引力制备阳离子型聚电解质复合物PAH-PASP,分别采用传统浸渍法和新型喷涂法两种方式层层组装构筑(PASP4.0/PAH-PASP7.5)*n复合物空白膜并对其进行DNR后扩散负载及药物释放研究。结果表明:浸渍法复合物空白膜中较高周期数可获得较大载药量,周期数为10.5时,载药量1.15 mg,DNR持续释放30 h左右;DNR后扩散负载过程中的吹干操作有利于增大载药量,延长药物释放时间;与浸渍法相同条件下构筑的喷涂法复合物空白膜载药量偏低,药物发生突释现象。最后,将层层组装负载MTX与后扩散负载DNR相结合,成功制备了MTX与DNR的双抗癌药物共同负载体系,并对其进行负载与缓释性能研究。结果表明:(PASP4.0/PAH-MTX7.5)*18PASP4.0/PAH-PASP7.5*15.5DNR中DNR首先释放7 h,MTX从5 h开始持续释放至120 h左右,呈DNR先快速释放,MTX后缓慢释放的阶梯式差别性缓释效果;以PASP/PDDA构筑外层空白膜所得(PASP4.0/PAH-MTX7.5)*18PASP4.0/PDDA5.5*15.5DNR双药物负载体系中,DNR与MTX几乎同时释放,DNR释放15 h,MTX持续释放约200 h,呈DNR与MTX快慢差别性释放效果;以上两种双药物负载体系的成功制备,说明此双药物差别式联合载药法具备一定的普适性,为多药物差别性释放体系的制备提供了一种新方式。细胞实验结果表明,MTX单药物负载体系及MTX、DNR双药物共同负载体系均对癌细胞的增值起到一定的抑制作用,且双药物负载体系对癌细胞的抑制作用更加明显,由此体现出联合用药的优势。