【摘 要】
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目的探讨西罗莫司(SRL)在体外诱导大鼠脑胶质瘤C6细胞的凋亡作用及其机制。方法以不同浓度的SRL(25、50、75、100和150nmol/L)作用于体外培养的鼠胶质瘤细胞株C6,MTT法检测细胞生
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目的探讨西罗莫司(SRL)在体外诱导大鼠脑胶质瘤C6细胞的凋亡作用及其机制。方法以不同浓度的SRL(25、50、75、100和150nmol/L)作用于体外培养的鼠胶质瘤细胞株C6,MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞仪检测培养48h时的细胞凋亡情况;Hoechst 33258荧光染色法和透射电镜观察细胞凋亡时的形态变化;FCM检测细胞线粒体跨膜电位(Δ¢m)变化。结果SRL可显著抑制C6细胞的活力;流式细胞术分析表明SRL可将C6细胞阻滞于G1期,从而抑制细胞G2/S期的转换,使细胞增殖受到限制,诱导细胞发生早期凋亡作用,且凋亡百分率呈浓度依赖性,SRL对C6细胞晚期凋亡率无影响,主要增加早期凋亡率;SRL作用C6细胞后24h,在Hoechst33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,在透射电镜图片上可观察到微绒毛明显减少,胞膜皱缩,细胞内出现空泡,染色质边集,但细胞膜仍保持完整,呈典型的细胞凋亡形态特征,细胞凋亡过程中线粒体跨膜电位下降。结论SRL能诱导C6细胞凋亡,呈剂量依赖性,主要通过将C6细胞阻滞于G1期,从而抑制细胞G2/S期的转换,使细胞增殖受到限制,诱导细胞发生早期凋亡作用,SRL诱导C6细胞凋亡的机制可能与选择性抑制mTOR信号有关。
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