催乳素基因多态性及其与小尾寒羊高繁殖力相关性的研究

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本研究以小尾寒羊(142只)、湖羊(40只)、特克塞尔羊(36只)、多赛特羊(36只)和考力代羊(28只)这五个绵羊品种为实验材料,应用PCR-SSCP对PRL基因的DNA编码序列的多态性进行了分析,并进一步对该基因与小尾寒羊高繁殖力之间的关系进行了研究。结果表明:5个绵羊品种在引物2的扩增产物中均存在单核苷酸多态性,其中只有多赛特羊未检测出DD型,而其余4个绵羊品种均检测出CC、CD和DD型。小尾寒羊、特克塞尔羊、多赛特羊和考力代羊这四个绵羊品种在其他四个引物扩增产物中均未检测到单核苷酸多态性。然而,只有湖羊的5对引物的PCR扩增产物在整个DNA编码序列中均检测到多态性。克隆测序后连接出绵羊PRL基因DNA编码序列的总长度为926bp,与牛的PRL基因DNA全序列(登录号:AF426315)相应区域的同源性高达98.25%,与NCBI上公布的绵羊的PRL基因mRNA(登录号:NM 001009306)的同源性高达98%(野生型)、97%(突变型)。绵羊PRL基因野生型和突变型的DNA编码区的同源性为98.7%(914/926),该编码区一共编码240个氨基酸,野生型和突变型之间的氨基酸同源性为98.75%(237╱240)。在整个催乳素基因的DNA编码区,经检测野生型和突变型一共存在12处碱基突变,但是只有3个突变为有义突变,所导致的氨基酸突变分别为:第27位氨基酸发生了从Leu到Pro的突变,第149位氨基酸发生了Ala到Val的突变,第206位氨基酸发生了Tyr到His的突变。对五个品种具有多态性的引物的扩增片段进行x~2适合性检验,结果表明:引物2扩增片段在特克塞尔羊群体中的分布显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.05),而在小尾寒羊、湖羊、多赛特羊和考力代羊中都保持了Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。对有产羔记录的小尾寒羊群体的引物2扩增产物的突变位点与它的产羔数进行最小二乘分析,结果表明:CC型小尾寒羊平均产羔数分别比CD型和DD型多0.39只(P<0.05)和0.98只(P<0.05),CD型和DD型小尾寒羊平均产羔数差异不显著(P>0.05)。C等位基因对D等位基因的显性度为0.20。结果显示,Leu到Pro的突变对小尾寒羊的产羔率有显著的影响。最终结果表明PRL基因的野生型(第27位氨基酸为Leu),编码的催乳素的表达水平可能较低,从而有助于提高小尾寒羊的产羔率。
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