铁元素在生命有机体的新陈代谢及生长发育过程中均起着重要的作用,缺铁会引起不良反应。但是铁在自然界中主要以难溶性铁化合物的状态存在,这些铁化合物大部分不能直接被生物吸收、利用。随着生物进化,微生物可以借助铁载吸收难溶性铁元素。生防菌Act12分离自青藏高原,经16S r DNA序列分析,鉴定其为密旋链霉菌（Streptomyces pactum）。Act12对多种土壤病原真菌具有明显抑制作用,对甜瓜等作物表现良好的促生效果,但其防病促生机理尚不清楚。目前已完成其全基因组测序。根据基因组注释分析,Act12中有两种铁载体基因簇。本研究通过同源双交换法对Act12铁载体Sers基因簇中的合成酶基因SerB和调控基因Ser F进行功能验证,并对铁载体进行初步分离纯化,为揭示Act12的防病促生机理奠定基础,取得如下结果:（1）以卡那霉素抗性基因为筛选标记,目的基因的上下游片段为同源交换臂,利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒p KC1132构建基因敲除载体。通过接合转移转入Act12中对目的基因进行敲除,通过PCR和RT-PCR检测,获得13个SerB基因缺失突变体,6个Ser F基因缺失突变体。（2）对基因缺失突变体进行生物学特性分析,在铁载体产量、甜瓜种子萌发、抗病原真菌等方面和野生型菌株Act12相比,SerB基因缺失突变体的铁载体合成量减少11%,发酵滤液抑制甜瓜种子萌发,对苹果轮纹病菌抑菌活性有所降低。Ser F基因缺失突变体的铁载体合成量增加16.4%,发酵滤液对甜瓜种子的萌发没有影响,对苹果轮纹病菌抑菌活性没有变化。（3）经基因回复验证,基因互补突变体的铁载体产量及其它表型均回复到野生型菌株Act12的铁载体产量及表型,表明基因缺失突变体的铁载体产量及表型的变化是由目的基因被敲除引起的,进而初步验证了SerB基因和Ser F基因的功能。（4）通过FeCl₃试验、Arown试验和Csaky试验,确定Act12合成的铁载体为氧肟酸型铁载体。在限铁条件下发酵Act12,发酵液经大孔吸附树脂XAD-2、葡聚糖凝胶柱LH-20初步分离纯化,得到3个含铁载体的样品,其中样品100A对苹果轮纹病菌有抑菌活性。本研究结果表明,SerB基因参与Act12铁载体的合成,Ser F基因对Act12铁载体合成起负调控作用,而且Act12分泌的铁载体对甜瓜种子的萌发和苹果轮纹病菌的抑菌活性起到一定的作用,为进一步研究Act12的防病促生机理奠定基础。