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血管内皮生长因子具有特异性促进内皮细胞增殖，诱发新生血管生长的作用。利用血管内皮生长因子（VEGF）基因诱导治疗性新生血管生成，从而治疗缺血性心脏病和缺血性下肢疾病，是一种很有前景的方法。VEGF基因成功治疗肢体血管闭塞症和心脏缺血性疾病的临床试验在国外已有较多的报道。将外源基因VEGF导入到机体或细胞内是基因治疗的前提，目前，已有很多种技术和方法可将外源基因转移到真核细胞中。病毒载体因其体内、外转染效率均较高，而成为在当前VEGF基因治疗的基础和临床研究中应用得最多的载体。然而，病毒载体的安全性仍然是一个不容忽视的问题。病毒载体的安全性问题主要存在于两个方面，首先，由于它们易被机体识别为异源物质而可能具有免疫原性（immunogenicity），另外一个更大的威胁是它可能将外源基因或者自身基因片段随机插入到宿主基因转录与／或调控区域，造成宿主细胞正常功能基因的失活与某些沉默基因的激活，从而可能引发肿瘤或其它疾病。因此，病毒载体并不是基因治疗最理想的载体。医学遗传学国家重点实验室构建的人源基因载体—核糖体基因（rDNA）区靶向表达载体pHrneo能携带外源基因以较高的效率(10-4-10-5)定点整合至人rDNA基因区。人每细胞有约600-800拷贝的rDNA基因，破坏一个拷贝对细胞维持正常的功能没有影响，是安全的基因治疗靶位点；而另一方面rDNA基因区编码核糖体RNA（rRNA），是转录异常活跃的染色体区域，外源基因整合于rDNA基因区可以有效的表达。因此，以人源基因载体pHrneo将外源基因VFGE定点整合于人rDNA基因区，将能实现外源基因安全、稳定和有效的表达。本实验先成功地克隆出了VEGF基因片段，然后构建了携带VEGF基因的人源基因载体pHrneo-VEGF165，将构建的载体转入细胞内，测定定点整合及筛选定点细胞克隆，通过ELSA、RT-PCR、Western-blot等实验方法，检测出了VEGF的定点表达，为利用VEGF基因治疗缺血性心脏病和缺血性下肢疾病提供新的视角。