广藿香内生真菌及其次生代谢产物的分离鉴定与生物活性研究

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenyanzhao12
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
广藿香[Pogostemon cablin(Blanco.)Benth.]为唇形科刺蕊草属植物,自古以来广藿香已广泛用作药材,其具有拮抗病原菌、抗肿瘤、抗氧化、杀虫等药理作用。由于内生真菌能产生与宿主植物类似和结构新颖的次生代谢产物,研究广藿香内生真菌及其次生代谢产物对于诠释广藿香与内生真菌的生态互作具有重要科学意义。本论文对广藿香根、茎、叶、花各部位的内生真菌进行分离,采用显微形态观察和ITS序列分析鉴定;通过活性测试筛选优势菌株,应用柱层析技术与PRE-HPLC制备技术分离优势菌株次生代谢产物,采用核磁共振仪、红外光谱仪、紫外分光光度计、旋光仪、质谱仪等波谱技术进行结构鉴定;采用各种活性筛选模型测定化合物的生物活性,发现生物活性物质。主要研究成果如下:通过平板分离法从广藿香的根、茎、叶和花等组织中分离获得61株内生真菌,采用显微形态观察和ITS序列分析鉴定为15个属,其中优势菌群为炭疽菌属(Colletotrichum)和干酪酵母菌属(Meyerozyma),比例分别是21.31%和27.87%。以澳洲坚果叶枯病菌(Pestalotiopsis microspora)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)和火龙果溃疡病菌(Neoscytalidium dimidiatum)为指示菌,采用平板对峙法进行拮抗菌株筛选,发现镰刀菌属(Fusarium)菌株Pfu J20、Pfu G16和Pfu G5对澳洲坚果叶枯病菌的抑制效果最好(抑制率>80%),棒孢属(Corynespora)菌株Pfu H2对西瓜枯萎病菌抑菌效果较好(抑制率>60%)。采用滤纸片扩散法进行各菌株对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌等动植物病原细菌的抑菌作用评价,发现镰刀菌属Pfu J20、Pfu G16对各细菌均有较强抑制作用,而链格孢属(Alternaria)Pfu H1对金黄色葡萄球菌的生长抑制作用最强。通过硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、HPLC制备等分离方法对广藿香花中内生真菌链格孢菌Pfu H1的发酵产物进行分离纯化,根据广泛的光谱分析和文献比较,总共分离鉴定出12个化合物,类型主要包括二苯-α-吡喃酮类(交链格孢酚、交链孢酚单甲醚、异细交链孢素和交链格孢烯)、二萘嵌苯醌类(交链格孢毒素)、联二苯-α-吡喃酮类及混源萜类。分别鉴定为3-O-demethylaltenuisol(1),alternariol(2),alternariol-9-O-methyl ether(3),异细交链孢素(4),(-)-dialtenuisol(5),(+)-dialtenuisol(6),(2S,3S,4a S)-altenuene(7),(2R,3R,4a R)-altenuene(8),altertoxinⅧ(9)、altertoxinⅨ(10),stemphytriol(11),tricycloalternarene 3b(12),其中获得的5个新化合物分别为(1)、(5)、(6)、(9)、(10)。通过滤纸片法及96孔板倍比稀释法对化合物进行抑菌活性初筛,结果显示化合物9对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用(MIC=17.33μg/m L);化合物4对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都表现出较弱的抑制作用,MIC分别为85.33μg/m L、128.00μg/m L;化合物2对大肠杆菌有较强的抑制作用(MIC=9.33μg/m L)。通过MTT法对分离获得的化合物进行抗肿瘤活性测定,以100μg/m L为初筛浓度,结果显示化合物3、7、10对肿瘤K562细胞株有较弱抑制作用,化合物1、8、12有中等抑制效果,化合物11和化合物12对肿瘤SGC细胞株有较弱的抑制作用,化合物6对肿瘤HELA细胞株有一定的抑制作用。进一步对起到抑制作用的化合物进行IC50测试,结果显示只有tricycloalternarene 3b(12)具有一定活性(IC50=35.93±3.11μM)。
其他文献
学位
传统媒体消费中,图像或视频等内容主要呈现在用户视网膜的中央视觉区域中。但近期虚拟现实技术打破了传统的观看形式,其配置的沉浸式头盔显示器将有效观看视场(媒体内容覆盖的视场区域)从水平方向上的20°拓宽至110°甚至更大。这种宽视场、超高清的媒体内容带来的庞大数据量加重了传输带宽负荷,现有网络条件难以承担。因此,如何在有限传输带宽下保证用户对全景内容的优质视觉体验成为虚拟现实应用普及亟需解决的问题。本
学位
学位
左氧氟沙星(LFX)是一种常见的氟喹诺酮类抗生素,由于其出色的抗菌性能而被广泛地应用在临床医学以及兽用中。随着LFX的大量使用,研究发现,LFX既不能被人体或动物完全代谢,排入污水处理厂中也不能被常规的处理方法完全去除,残留的LFX随污水处理厂出水或污泥进入环境中,对人体及水生生物造成危害。目前,低温等离子体技术由于其高氧化性和低选择性而受到越来越多的关注,将其视作一种高效的高级氧化技术应用在环境
电镀行业排放大量废水,重金属镍是废水中的主要有毒物质。近年来,我国对电镀行业中镍的排放限值要求日趋严格,为废水深度处理提出了新挑战。该行业废水处理的最大难题是化学镀镍废水,废水中含有多种有机络合剂,通过螯合作用提高Ni的稳定性,导致单一传统的物化处理工艺难以实现Ni的稳定达标排放。臭氧化耦合物化处理联合工艺可以有效去除含镍络合物,但对实际废水处理效果仍有待进一步验证。另一方面,废水中Ni的赋存形态
学位
学位
学位
随着电影产业化的深入,国产犯罪片近几年异军突起,成为了电影行业和观众的焦点,不仅斩获国内外电影节的各大奖项,也取得了良好的票房成绩。自2013年起,国产犯罪片在创作上有所转向,以犯罪者为中心,不仅更加尖锐的展现出社会病症,还更加注重挖掘犯罪者的精神世界和个体生存状态。在带给观众视听上的冲击与精神上的释放的同时,也让观众无意识的挖掘犯罪者表征中所蕴含的主体性异化的内涵。这既是国产犯罪片对主体性的追问