初级感觉神经元在咬合创伤致牙髓组织损害和伤害感受中的作用

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w_zhou
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创伤性咬合既引起口面部多组织的损害,还导致口面部深部组织的慢性疼痛。而初级感觉神经元受刺激后,出现传入、传出功能以及敏感性的变化。这些变化参与组织损伤和慢性疼痛。在创伤性咬合导致的组织损害和慢性疼痛的研究中,未见实验观察初级感觉神经元的作用的研究。 创伤性咬合引起牙齿感觉过敏症及牙髓炎等牙髓疾病,这些疾病的主要病理改变是早期的牙髓充血和晚期的牙髓炎症、变性、坏死。研究人员根据病理研究结果,推测其发病机制是咬合创伤引起牙髓血液循环障碍。咬合创伤如何引起牙髓血液循环障碍?目前普遍认为是过大殆力对牙周血管的压迫作用。即创伤(牙合)时,施加到牙齿的过大的(牙合)力压迫牙周、根尖周血管,包括经过根尖孔和侧枝根管进入牙髓的血管,导致牙髓血液循环障碍。但是,新的微循环理论认为,初级感觉神经元受到刺激后,感觉神经末梢逆行性释放P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)等血管活性神经肽,引起牙髓血管扩张和浆液渗出,调节微循环,并参与外周的组织损伤、炎症、免疫、修复等反应。Kvinnsland的实验和我们前期实验的结果显示咬合创伤后牙髓SP-、CGRP-阳性纤维表达发生变化。综合这两个实验的结果和SP、CGRP的作用,提示咬合创伤可能是通过牙髓感觉神经的传出功能,影响牙髓血液循环、牙本质形成等牙髓组织的结构和功能,引起牙齿感觉过敏症及牙髓炎等牙髓疾病。但目前还没有实验观察咬合创伤一牙髓感觉神经传出功能的变化—牙髓组织的结构和功能三者间的直接关系。 创伤性咬合除引起口面部组织损害外,还导致口面部深部组织的慢性疼痛。口面部慢性疼痛本身作为一种常见的疾病,又难以治愈,研究解放车军供进修学院博土后出站报告 摘要口面部慢性疼痛的机制有重要的临床意义。但目前口面痛机制研究的主要内容是口面部急性疼痛的中枢传导和痛觉调控机制。口面部慢性痛的研究热点仍集中在分析额下颌关节(TMJ)及相关肌肉慢性疼痛的病因、治疗、心理因素的作用方面。口面部慢性痛机制的研究相对薄弱,尤以初级感觉神经元敏化改变的研究匾乏。而慢性疼痛的机制正是当前神经科学领域研究的重点和热点。研究结果证明长期、反复的伤害性刺激引起初级感觉神经元表型变化。正常情况下少表达或不表达的疼痛兴奋性神经递质和受体系统的合成、表达和释放显著增加,使神经元致敏,是慢性疼痛的重要发病机制。SP、谷氨酸(*IU ) 是极为重要的疼痛兴奋性递质,它们在初级中枢中合成。表达和释放增加是神经元兴奋性增高、致敏的标志,也是机体产生慢性疼痛的主要机制。因此,观察咬合创伤后初级中枢SP、Gill及其受体的变化,能明确咬合创伤后是否发生了初级中枢的敏化现象,有助于了解日面部慢性疼痛的机制。 PN3、NSN 两种钠通道只在伤害感受神经元中特异表达。外周组织和神经损伤后,初级感觉神经元钠通道基因表达和电生理性质的变化是疼痛的分子病理生理学基础,是伤害感受器致敏的关键机制。但口面部组织和神经慢性损伤后,两种通道表达的研究极少,不清楚PN。、NaN的变化趋势。 针对上述研究现状,我们设计本实验。第一部分:咬合创伤后初级感觉神经元钠通道和中枢端末梢的变化 目的:了解咬合创伤后初级感觉神经元传入功能和敏感化的改变:观察咬合创伤后,初级中枢兴奋性递质和受体的合成、中枢端末梢释放。伤害感受特异性钠通道基因表达的状况。分析日面部慢性疼痛时,初级感觉神经元痛信号发生、传导以及敏感化机制。 方法:制备大鼠持续性咬合创伤模型,采用分子杂交和免疫组织化学染色方法,观察不同时间点、三叉神经节前速激肽原(PPTA)mRNA。6-CGRP mRNA和三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)SP、NMDA受体亚单位l型(NMDAR)表达的变化。采用RT-PCR方法观察下牙槽神经干损伤和咬合创伤大鼠三叉神经节中 PN3 mRNA、NaN mRNA表达的变化。 .2-解放军军医进修学院博十后出站报告 摘要 结果: O)持续性咬合创伤后,实验侧三叉神经节 PPTA mRNA和 6-CGRPmRNA表达高于对照侧。咬合创伤 7天组,实验侧 PPTA mRNA和日.CGRP mRNA表达增高程度高于 15天和 30天组。15天和 30天两组间PPTA mRNA和 p-CGRP mRNA的表达增高幅度降低。 (2)咬合创伤7天,实验侧VC内SP、NMDARI表达显著高于对照侧。咬合创伤 15天,实验侧 VC内 SP、NMDARI表达的灰度均数值高于对照侧,但无统计学意义。咬合创伤30天,实验侧VC内SP兔疫阳性结构灰度均数值仍高于对照侧,但两侧的差距小于 15天组。NMDARI免疫阳性结构灰度均数值与对照侧的灰度均数值接近。 (3)PN。mRNA和 NaN mRNA在对照组、神经损伤组和咬合创伤组均有表达。咬合创伤后 30天,PN3 mRNA和 NaN mRNA表达轻度上调。单纯切断下牙槽神经干 30天,PN;mRNA和 NaNmRNA表达下调。 结论:咬合创伤后,初级
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