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研究目的:1.采用不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)对牛脱钙骨基质(DBM)进行表面修饰,制备具有BSA涂层的DBM支架材料,观察各组支架表征并对其性能进行分析;2.无菌环境下,小鼠成纤维细胞(L929)与BSA改性前后的DBM支架共培养,观察细胞在支架表面的生长情况,测定支架材料对细胞增殖活性的影响;3.L929细胞与支架材料在无菌环境下共培养一定时间后,测定BSA改性前后的DBM支架对细胞的黏附能力,探寻适宜的BSA浓度。研究方法:1.取牛松质骨体外脱脂脱钙后制得DBM支架材料作为对照组,使用浓度为10 mg/ml、20 mg/ml、30 mg/ml、40 mg/ml 的BSA溶液处理DBM,冷冻干燥法制备的具有BSA涂层的支架作为实验组。扫描电子显微镜下观察支架的表面形貌,傅里叶变换红外光谱分析BSA的结合情况,并对支架的孔隙率、降解速率、接触角进行测定。2.复苏L929细胞,将生长情况良好的细胞接种到无菌DBM支架及具有BSA涂层的支架内,共培养3d,扫描电镜下观察细胞在支架内生长情况,MTT法检测BSA改性前后的支架对细胞增殖活性的影响。3.将L929细胞接种到改性前后的DBM支架内,6h后DAPI染液处理细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞黏附情况;细胞接种到支架内6 h后,MTT法测定支架对细胞的黏附性能。研究结果:1.DBM支架呈疏松多孔的海绵状结构,支架内部孔径大小不一,形状多为不规则圆形或椭圆形,内部孔隙相互交通,孔径多在350～450 μm之间,孔隙率为(69.28±2.46)%。不同浓度的BSA改性后,支架孔径及孔隙率不同程度降低,降解速率加快,亲水性增加。2.DBM及改性后支架表面均观察到细胞附着,细胞生长情况良好。MTT结果显示,实验组20 mg/ml BSA处理的支架与DBM支架组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.激光共聚焦显微镜下,细胞核呈圆形蓝染结构,在各组支架内部呈三维立体形式分布,当BSA浓度为20 mg/ml、30 mg/ml时,BSA包被的支架与DBM支架相比黏附的细胞数量增加;吸光度值结果显示,实验组20 mg/ml、30 mg/ml BSA处理DBM支架与其余各组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究结论:1.成功制备了DBM支架及具有BSA涂层的DBM支架,改性后支架材料孔径、孔隙率降低,体外降解速率加快,支架亲水性能增加。2.DBM支架及具有BSA涂层的DBM支架均具有良好的细胞相容性,而20 mg/ml BSA修饰后支架可显著促进细胞增殖。3.BSA改性前后的DBM支架与细胞共培养,20 mg/ml、30 mg/ml BSA修饰后支架可促进细胞对支架的黏附。