云芝野生菌株ISSR分析及种质资源评价

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w123youlin
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云芝是一种世界范围内广泛分布的真菌,在我国具有悠久的药用历史。现代研究表明云芝的主要活性成分云芝多糖具有广泛的生物活性,能明显提高人体免疫力、调节内分泌、对人体各器官机能都有良好的调节和保护作用;同时能有效的抑制癌细胞扩散及肿瘤生长,减轻化疗造成的副作用。   云芝是一种白腐菌能分泌多种酶分解木质素和纤维素,在自然界碳循环中起重要作用。其中云芝漆酶具有广泛的底物作用,可催化多种酚类和芳香胺类化合物的氧化,降解多环芳烃,因而它在木质素的生物降解、废水处理、生物漂白、环境污染物脱毒,土壤修复等方面具有广泛的应用价值。   由于具有明确的药用价值和广泛的工业应用潜力,近年来云芝日益受到生物、医学、环境诸学科的广泛关注和高度重视,是一种极具应用潜力的真菌。但是,目前应用形态学的方法对云芝物种的准确鉴定仍存在困难,尚无应用分子方法对云芝菌株的标记和种质资源评价的研究报道。   本研究在全国范围内采集到野生云芝菌种34株。对所采集到的菌株进行了形态学鉴定和ITS序列分析。结果显示:基于ITS序列的分子鉴定与传统形态学鉴定的结果具有一致性。ITS序列是云芝菌种鉴定的有效的分子标记。   本研究采用ISSR标记技术对34株野生云芝菌株进行遗传多样性分析。通过正交试验筛选得到稳定的反应体系(25.0μL,):dNTPs250.0μmol/L、引物1.2μmol/L、easyTaqDNA聚合酶1.0U,Mg2+3.5mmol/L,DNA模板10.0ng。从20条引物中筛选出7条ISSR引物,扩增得到95个扩增位点,其中多态性位点88个。多态性位点占92.6%,表明ISSR标记的多态性非常高。基于ISSR条带构建亲缘关系树状图,其中遗传变异系数范围为0.58-0.91。34个云芝菌株在相似系数0.60时分为4个类群,不同菌株的遗传差异性与地理分布有一定联系。   本研究还进行了筛选目前广泛关注的云芝多糖和漆酶的优良菌种的研究工作,得到产生云芝多糖的高产菌株和漆酶高产菌株各三株。
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