【摘 要】
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目的:通过将脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)以及富含血小板血浆(platelet rich platelet,PRP)联合作用于糖尿病大鼠创面,观察创面愈合效果,为以后临床应用提
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目的:通过将脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)以及富含血小板血浆(platelet rich platelet,PRP)联合作用于糖尿病大鼠创面,观察创面愈合效果,为以后临床应用提供科学基础。方法:准备55只清洁级雄性SD大鼠(体重180-220g),随机取6只用于心脏取血制备PRP,4只用于提取ADSCs,余45只随机均分成5组,每组9只。其中1组健康组作为正常对照组。其余4组适应性喂养1周后按40mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病。3天后测随机血糖大于16.7mM,1周后复测血糖稳定者视为糖尿病大鼠造模成功,将这4组大鼠随机分为糖尿病组、ADSCs组、PRP组及联合治疗组4组进行实验。在45只大鼠背部对称部位制造90个1.5cm×1.5cm创面,分别于第3、7、14天观察创面愈合情况,皮肤细胞病理及相关因子的改变。结果:随时间延长,每组大鼠背部伤口均出现不同程度的愈合。其中,糖尿病组愈合速度最慢,正常组愈合程度最快,联合治疗组愈合速度优于ADSCs组以及PRP组。HE染色显示,联合治疗组相对于糖尿病组,肉芽组织生成明显增加,炎性细胞数量降低。Masson染色与天狼猩红染色显示,联合治疗组胶原生成明显优于糖尿病组。胶原蛋白相关基因,TGF-β、Col 1a1、Vim在糖尿病组中低表达,联合治疗可提高其表达含量。联合治疗组可有效提升糖尿病组中α-SMA表达量。糖尿病组CD31在内皮细胞表达量低于联合治疗组,而在非内皮细胞上表达量高于联合治疗组。在糖尿病组中VEGF表达降低,而联合治疗可改变这一情况。糖尿病组中凋亡相关基因Caspase-3、9表达较高,细胞周期相关基因cyclin D1及Pcna表达较低,金属基质蛋白酶MMP-2、9表达较高,不利于创面愈合。而联合治疗组能够改变以上基因的表达。结论:联合应用ADSCs和PRP可以通过降低伤口细胞凋亡水平,促进细胞增殖,降低MMPs的含量,进而促进创面肉芽组织以及胶原蛋白的生成,最终促进糖尿病大鼠创面的愈合。
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