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目的：本研究应用人工体外汗腺细胞损伤的微环境,诱导人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)向汗腺细胞转化,并通过检测不同组别抗原的表达情况,探讨表皮细胞生长因子(EGF)对转化的影响,以及在转化过程中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路的作用,为临床应用人脐带间充质干细胞重建汗腺提供理论依据。方法：无菌条件下获得足月妊娠分娩胎儿的脐带,将其用剪刀剪切成4cm左右长短的脐带组织段,无菌生理盐水反复冲洗干净,除去脐带中残留的血液,剔除血管(一条脐静脉,两条脐动脉)以避免被血管内皮细胞污染。取出脐带中的华通胶组织(Wharton’s Jelly),撕裂成条索状,用剪刀将其剪成大小约1mm3的Wharton’s Jelly组织块,将组织块置于培养瓶中,采用组织块培养法得到脐带间充质干细胞(UC-MSCs),流式细胞术检测其表面抗原表达情况；取人头、面、颈部正常全层皮肤,用Ⅱ型胶原酶消化法获得汗腺组织,培养汗腺细胞(h-SGCs)贴壁生长,免疫组织化学法检测其为纯化的h-SGCs；依据干细胞诱导分化的微环境理论,将h-SGCs行热损伤处理,消化后种植于transwell小室,将第四代的UC-MSCs种植于transwell板下层,诱导间充值干细胞向汗腺细胞表型转化,并依据处理因素不同,分为四组,组1：对照组,UC-MSCs用h-SGCs培养基培养,不加热休克h-SGCs；组2：UC-MSCs用h-SGCs培养基培养,于transwell小室中放入热损伤h-SGCs进行诱导；组3：在组2基础上,加入50ng/ml的EGF；组4：在组2基础上加入10ng/ml的PD98059。一周后用流式细胞术检测共培养的UC-MSCs的CK7、CK19表达率,用免疫组织化学法检测其CK19、CEA的染色情况,并应用SPSS13.0统计软件进行数据统计分析。结果：(1)流式细胞技术检测显示：①培养传代的UC-MSCs CD14、CD29、CD34、CD44、CD45、CD105、CK7、CK19阳性率分别为0.6%,91.3%,0.6%,99.1%,0.9%,99.2%,0.8%,0.9%。其中CD29、CD44、CD105为干细胞表面标志物,表达率高,CD14、CD34、CD45为造血干细胞表面标志物,几乎不表达,证明培养获得的细胞为纯化的间充质干细胞。CK7、CK19在培养的细胞中的阳性率很低,说明UC-MSCs正常情况下不表达CK7、CK19等标志物。②对各组进行流式细胞术检测,组1 CK7、CK19阳性率分别为：(2.20±1.51)%,(2.23±0.68)%；组2 CK7、CK19阳性率分别为(6.37±0.74)%,(5.73±0.32)%：组3 CK7、CK19阳性率分别为(14.3±0.96)%,(12.57±1.06)%：组4 CK7、CK19阳性率分别为(2.30±1.08)%,(2.13±0.61)%。CK7统计结果显示,组1和组4没有明显统计学差异(P=0.999＞0.05),组2与组3的表达阳性率明显高于这两组,组2与组1(P=0.005＜0.05),组3与组1(P=0.000＜0.05),且组3高于组2(P=0.001＜0.05)。CK19统计结果显示,组1和组4没有明显统计学差异(P=0.997＞0.05),组2与组3的表达阳性率明显高于这两组,组2与组1：(P=0.005＜0.05),组3与组4：(P=0.000＜0.05),且组3高于组2(P=0.001＜0.05)；(2)免疫组织化学染色结果：培养的人UC-MSCs的CEA和CK19免疫组织化学染色为阴性,培养的UC-MSCs不表达CEA和CK19,由于CEA和CK19表面抗原相结合可作为汗腺细胞的标志物,说明其不具有汗腺细胞的表型；而获得的汗腺细胞的CEA和CK19染色均为阳性,证明为纯化的汗腺细胞。不同条件下培养的各组细胞均有部分细胞表达CEA和CK19阳性,其中组3表达阳性细胞数最高。每组选取6个视野计算各组细胞表达CEA的阳性率,组1的CEA平均阳性率为(3.33±0.71)%；组2的CEA平均阳性率分别为(7.43±1.01)%；组3后的UC-MSCs的CEA平均阳性率分别为(17.63±2.31)%；组4的CEA平均阳性率分别为(3.17±0.35)%。统计结果显示,组1和组4没有明显统计学差异(P=0.997＞0.05),组2与组3的阳性表达率明显高于这两组,组2与组1：(P=0.005＜0.05),组3与组1：(P=0.000＜0.05)，且组3高于组2：(P=0.001＜0.05)。(3) Western blot:组1至组4各组的OD值分别为：组1：(0.64±0.026),组2：(0.79±0.049),组3(1.20±0.032),组4(0.62±0.042),组1与组4之间p-ERK表达相对强度无统计学差异(P=0.910>0.05),组3表达相对强度最高,其次是组2,与组1统计分析后的差异分别为：(P=0.000＜0.05)、(P=0.003＜0.05),并且组3的表达强度高于组2。结论：UC-MSCs与热损伤的h-SGCs经transwell板间接共同培养后,部分UC-MSCs表面抗原CK7、CK19、CEA表达阳性,证明已具有h-SGCs的表型,提示体外h-SGCs损伤的微环境具有促进UC-MSCs向h-SGCs分化的作用；而在培养基加入50ng/mlEGF的组3的细胞表面抗原阳性率明显高于组2和对照组,加入ERK信号通路特异性抑制剂PD98059的组4与对照组阳性表达率没有统计学差异,并且低于组2和组3,证明EGF可以明显促进UC-MSCs向汗腺细胞转化,并且ERK通路在通过共培养的方法诱导UC-MSCs向h-SGCs转化以及EGF促进UC-MSCs向汗腺细胞转化过程中发挥了重要作用。