论文部分内容阅读
研究目的：应用乌司他丁对光气所致急性肺损伤的大鼠进行干预,探讨乌司他丁的治疗作用、剂量与疗效的关系：以及探讨白细胞介素-15(interleukin-15, IL-15)和细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, IC AM-1)在该病中的变化及其作用,进而探讨光气所致急性肺损伤发生的机制。材料和方法：第一部分：实验对象：雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,等级为SPF,体重(200±20)g。随机分为8个组：空气对照组(Ai组)、光气染毒组(Ph组)、乌司他丁预防组(Be组)、乌司他丁400kU/kg组(Uh组,治疗组,下同)、乌司他丁100kU/kg组(Um组)、乌司他丁3.3kU/kg组(U1组)、生理盐水对照组(Np组)以及地塞米松对照组(Dx组),每组10只。光气染毒模型的建造：除空气组外,其余各组大鼠暴露于浓度为5.0g/m3的光气中,染毒5分钟。染毒后观察大鼠的一般情况,6小时后处死大鼠,估算肺淤血面积率,采集肺组织、支气管肺泡灌洗液(Bronchoaleolar lavage fluid, BALF)以及全血等标本。分别进行肺湿干重比(ratio of lung wet weight/dry weight, W/D)测定与计算,BALF细胞计数及其分类,以及肺组织病理学观察。第二部分：在按第一部分方法处理的基础上,用酶联免疫吸附法(ELISA)对大鼠体内血清中ICAM-1和IL-15的浓度进行检测。使用Stata7.0统计软件进行分析。各数值表示为平均值±标准差。因各组数据的方差不齐,故采用Krusal-Wallis检验。结果：第一部分：剖开胸腔后,除空气组外,可观察到双肺体积增大,色泽明显发红(淤血区)或近似透明(水肿区)的区域呈地图状,或者表面散在出血点。剪取肺叶或剪断气管时,可见粉红色泡沫样液体溢出。光学显微镜下,Ph组大鼠肺组织部分区域形态紊乱,肺泡大小形态不规则,大量肺泡腔体积扩大,部分肺泡腔内有渗出的红细胞,肺泡壁厚度不均匀,可见断裂,甚至碎解。并见局部肺气肿,局灶性肺萎陷,间质血管扩张、充血。干预后以上情况有不同程度的改善。光气染毒后发生明显的肺水肿和细胞渗出(p=0.0015)。乌司他丁各治疗性给药组光气所致急性肺损伤的程度均减轻了,肺泡中渗出的细胞均减少了(p=0.0039,0.0009,0.0171)。并且,大剂量乌司他丁的治疗效果优于小剂量。从BALF中细胞总浓度看,Um组治疗效果优于Dx组(p=0.0209)；Um组的BALF细胞总浓度显著低于Be组(p=0.0384)。从W/D值来看,生理盐水和地塞米松均未能显著减轻肺水肿。第二部分：(1)Ph组的ICAM-1显著高于Ai组(p=0.0006)。乌司他丁其中两个治疗组以及预防性给药组大鼠血清中的ICAM-1显著减少。并且,Uh组的ICAM-1显著低于Um组(p=0.0192),也显著低于U1组(p=0.0099)。说明大剂量乌司他丁降低血清中ICAM-1浓度的效果最显著。乌司他丁降低血清中ICAM-1浓度的效果比地塞米松显著。乌司他丁治疗性给药与预防性给药降低血清中ICAM-1浓度的效果相似。(2)Ph组的IL-15显著高于Ai组(p=0.0009)。Um组的IL-15显著低于Ph组(p=0.0095)。推测乌司他丁常规剂量组血清中的IL-15水平显著降低。并且,血清中IL-15的浓度与乌司他丁的剂量呈负相关。Uh组的IL-15显著低于Dx组(p=0.0118)。乌司他丁预防性给药对血清中IL-15的水平无显著影响。Um组的IL-15显著低于Be组(p=0.0205)。提示乌司他丁治疗性给药降低血清中IL-15水平的作用比预防性给药要明显。结论：光气所致急性肺损伤早期,主要是红细胞等成分渗出,而可能没有显著的炎症细胞渗出。光气中毒早期的肺损伤主要是直接损伤。光气中毒早期,继发的的炎症性损伤已经启动。乌司他丁治疗性给药对光气所致急性肺损伤有效,并且大剂量组疗效更显著。肺淤血面积率、BALF细胞总浓度以及红细胞浓度等的规律与肺湿干比等基本一致,可能为评价肺损伤程度有意义的指标。IL-15可能通过趋化中性粒细胞,调节ICAM-1的表达,增加中性粒细胞粘附,来参与肺部炎症反应。乌司他丁治疗光气所致急性肺损伤,可以降低大鼠体内IL-15和ICAM-1的水平。