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本文旨在建立烟草中类胡萝卜素(Carotenoids)及其异构体的分离分析方法,并将其应用于烟叶调制过程中烟草类胡萝卜素降解变化的研究中。根据大量的文献调研并结合烟草化学成分分析的特点,研究建立了烟草中类胡萝卜素及其异构体的反相高效液相色谱——二极管阵列检测器(RP-HPLC-DAD)分析方法,分析了不同部位新鲜烟叶、醇化后不同类型烟叶中类胡萝卜素及其异构体的种类和含量;同时还分析研究了烘烤过程中不同部位烟叶中类胡萝卜素及其异构体的种类和含量的动态变化。这些研究为烟草及卷烟的工农业生产提供参考信息。论文主要工作总结如下:1.建立了反相高效液相色谱法测定烟草中类胡萝卜素及其异构体的分析方法。依据现代分析理论,在尽量减少分析时间和有毒溶剂用量的前提下,系统优化了前处理过程中的萃取溶剂及样品制备方法,同时试验考察了流动相的选择、配比,以及检测波长、柱温、流速等色谱条件对分离效果的影响,最终确定了最佳的分离分析条件,并从线性范围、检测限、回收率等方面对建立的分析方法进行了验证。实验结果表明,方法具有较低的检测限和较宽的线性范围,六种类胡萝卜素的检测限范围为18~42 ng/mL,相对标准偏差在3.01%~4.29%之间,回收率在87.7%~94.6%之间,方法适合于烟草中类胡萝卜素的分析测定。2.考察了烘烤过程中不同部位烟叶中类胡萝卜素及其异构体的种类和含量的动态变化。通过测定烘烤过程中不同部位烟叶中的类胡萝卜素和叶绿素的含量,分析了不同烘烤时间、烘烤温度下各种色素的降解变化规律,比较了不同部位烟叶中各种色素降解速度的差异,同时讨论了不同部位烟叶中水分与色素含量变化的协调性。这些研究工作为了解不同部位烟叶的烘烤特性和评价不同部位烟叶化学成分与烟叶品质及安全性的关系提供参考依据。3.采用柱层析法从菠菜中分离出四种类胡萝卜素,通过薄层色谱法、紫外分光光度法、化学反应法对分离得到的四种类胡萝卜素进行鉴定,最终分别定性为β-胡萝卜素、叶黄素、紫黄质和新黄质。通过纯度和浓度计算,分离得到的四种类胡萝卜素用来作为烟草中类胡萝卜素分析的参考标样,达到定量分析要求,结果令人满意。