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本文主要研究了透明颤菌血红蛋白(VHb)对固定化三角酵母D-氨基酸氧化酶(DAO)活力的影响，并初步探究了其作用机理。首先我们构建了VHb及融合VHb的DAO的表达质粒：pHVHB和pHVDAO，以Amberzyme环氧型载体固定纯化的VHb和DAO。其次，我们通过向固定化三角酵母DAO添加不同活力状态的VHb来验证其对固定化三角酵母DAO活力影响。在15mlCPC反应体系中含有0.3gDAO固定化酶，通入空气流量是30ml/min。添加1.0mg游离态VHb至反应体系中，DAO固定化酶活力提高4倍，当添加300mg固定化VHb至反应体系中，DAO固定化酶活力提高2倍。将DAO和融合蛋白HVDAO分别固定到五种环氧型固定化载体上，固定化酶活力测定结果表明融合蛋白HVDAO活力均大于DAO。将VHb和DAO按照比例共固定化时发现DAO固定化酶活力均高于相应固定化时不含VHb理论推算值。最后为了探究其作用机理，我们制备了同为黄素氧化酶的葡萄糖氧化酶和甲醇氧化酶的固定化酶，在酶活力测定过程中，分别加入游离态VHb和固定化VHb，结果添加两种形式VHb后，均能增加他们的酶活力。我们使用细菌双杂交技术验证了VHb与DAO之间的相互作用，以上结果显示VHb作为氧载体可能增加反应液中固定化酶周围氧浓度，并由于其与DAO的相互作用使这一优势更为明显。