舒芬太尼对小鼠周围神经损伤后神经再生修复的研究

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目的:  观察麻醉药品(舒芬太尼)对小鼠单侧坐骨神经损伤后,坐骨神经修复再生的形态学变化及相应脊髓节段神经元凋亡的变化和S-100的表达,探讨舒芬太尼对周围神经损伤后再生修复的影响。  方法:  选取健康Balb/c小鼠400只,用随机数字量表,随机分为五组,分别为舒芬太尼高、中、低剂量组、环孢素组和空白对照组,所有组的实验动物小鼠,在腹腔注射麻醉(氯胺酮100mg/kg麻醉)下,行单侧坐骨神经离断损伤模型,术后自由饮食水,舒芬太尼高、中、低剂量组、环孢素组、空白对照组分别进行腹腔注射舒芬太尼,环孢素,生理盐水。在各时间点,进行大体观察和手术切口观察,每组5只小鼠取其坐骨神经吻合口处上下0.5cm的神经组织,及其坐骨神经相应的脊髓节段L4-L6。  1、HE染色,光学显微镜下观察坐骨神经纤维的排列、形态变化等。LFB染色观察髓鞘的损伤情况,统计分析神经纤维的数量和直径。透射电镜下观察坐骨神经的髓鞘板层形态情况,神经元的芽式再生情况等。  2、取其L4-L6脊髓节段组织进行免疫组化染色观察S100的表达情况。West-blot检测Bcl-2及Bax蛋白的表达。  结果一般观察发现小鼠给予舒芬太尼后,出现阿片类药物反应。小鼠均表现为右足翻转呈跛行,左足活动正常,2w后右侧足底出现不同程度的溃疡。手术切口观察各组都出现不同程度的炎性反应。HE染色结果显示,实验组在2W时的坐骨神经纤维分布,排列情况较对照组好。  LFB的结果显示:  舒芬太尼组和环孢素组与空白对照组比较神经纤维的数量和直径的差异具有统计学意义(p<0.05)。透射电镜的结果显示,损伤后各时间点行电镜检测可见:各组坐骨神经纤维髓鞘形态,板层出现不同程度的变化。雪旺细胞不同程度增殖。L4-L6脊髓节段HE染色脊髓神经元S-100表达差异明显。West-blot检测SF能够促进Bcl-2的表达,抑制Bax的表达。  结论:  舒芬太尼可以抑制免疫炎性反应,降低周围神经损伤局部的破坏程度,减轻髓鞘的破坏,改善超微结构从而利于坐骨神经的再生。舒芬太尼可以通过促进Bcl-2的表达抑制Bax的表达从而抑制脊髓神经元的凋亡及促进S-100蛋白的表达而有利于神经的修复。
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