目的为了揭示环境亚硝酸盐暴露对癌细胞演进的影响,研究亚硝酸盐对人肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的作用,评价环境亚硝酸盐暴露与肝癌的关系,为科学制订食品、饮水亚硝酸盐健康标准,提供实验依据。方法用人肝癌SMMC-7721细胞为模型,以亚硝酸钠代表亚硝酸盐,以硝酸钠为对照,体外细胞增殖指标采用MTT细胞增殖活性、细胞计数、c-fos早期增殖基因;细胞凋亡模型采用氯化镉和乙醇诱导法,细胞凋亡检测采用流式细胞术FITC-annexinⅤ/PI双染法、Hoechst 33258荧光单染法、Hoechst 33258/PI活细胞联染法;细胞迁移和侵袭能力判定采用划痕实验和Transwell侵袭实验。比色法测定脂质过氧化产物与抗过氧化酶活性;免疫细胞化学法检测金属硫蛋白（MT）表达; Western-blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果MTT结果显示,亚硝酸钠浓度低于800 mg·L^-1时,细胞增殖活力呈非线性浓度依赖增殖关系,亚硝酸钠最小促增殖效应（超过对照组的11%）浓度为17 mg·L^-1。用一氧化氮（NO）特异性清除剂羧基-2-苯-4,4,5,5-四甲基咪唑^-1-氧-3-氧化物（c-PTIO）清除NO后,培养体系中的亚硝酸盐仍表现出一定的促细胞增殖作用。亚硝酸钠浓度高于800 mg·L^-1时,呈浓度依赖性增殖抑制。亚硝酸钠浓度在17-800 mg·L^-1时早期增殖基因c-fos表达量和细胞计数结果也呈现出非线性浓度依赖增加关系。用17 mg·L^-1亚硝酸钠建立亚硝酸盐短暂或慢性预适应细胞模型,两种细胞模型在受到氯化镉或乙醇作用时,与单纯氯化镉或乙醇组细胞相比增殖活力升高,细胞凋亡减少;同时细胞丙二醛（MDA）含量下降,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性升高,金属硫蛋白（MT）表达增强;Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量升高,细胞缺氧诱导因子^-1(hypoxia-inducible factor, HIF^-1α)表达量升高;低于800 mg·L^-1的亚硝酸钠还可以明显诱导HIF^-1α表达增强,加入一氧化氮清除剂c-PTIO,细胞HIF^-1α表达虽有所减少,但在一定浓度范围内,仍然促进细胞HIF^-1α表达增强; 17 mg·L^-1亚硝酸钠体外作用人肝癌SMMC-7721细胞24 h,可以使细胞划痕愈合的相对距离增大;亚硝酸钠孵育细胞48h后,培养液上清诱导24 h,可以使穿过人工基底膜的细胞数增多。结论1.低剂量亚硝酸钠促进SMMC-7721细胞增殖,高剂量亚硝酸钠抑制细胞增殖。2.低剂量亚硝酸钠预适应,可以使SMMC-7721细胞抗氧化能力和HIF-1α表达增高,拮抗氯化镉和乙醇诱导的细胞线粒体途径凋亡。3.低剂量亚硝酸钠可以提高人肝癌SMMC-7721细胞的迁移能力。4.低剂量亚硝酸钠孵育人肝癌SMMC-7721细胞的上清液可以促进细胞侵袭能力。