纳米金比色法检测克伦特罗和凝血酶

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纳米金比色法具有简单、快速、成本低廉等优点,引起研究者广泛关注。本论文以纳米金粒子作为比色探针,建立了检测克伦特罗和凝血酶的新分析方法。一、以表面带负电荷纳米金粒子为比色探针检测克伦特罗克伦特罗俗称“瘦肉精”,能使动物体内的脂肪转化为蛋白质。为了增加动物的瘦肉量,克伦特罗被非法地添加到饲料中。然而,食用含克伦特罗残留的肉制品会导致中毒。因此建立简单、快速、灵敏测定克伦特罗的分析方法具有重要的意义。本文发现克伦特罗可以使纳米金粒子发生团聚,从而使纳米金溶液的颜色从红色变为蓝色。据此现象,建立了一种测定克伦特罗的新方法。在优化的实验条件下,克伦特罗的浓度在2.0×10-9-1.0×10-6M范围内与纳米金溶液的吸光度比值(A640/A520)呈良好的线性关系,方法检出限为0.61nM。本法无需大型仪器,具有简单、快速、灵敏度高等优点,已应用于猪尿液中克伦特罗的检测,结果令人满意。二、基于表面带正电荷纳米金粒子与凝血酶适配体的相互作用比色法测定凝血酶凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶,在心血管疾病的形成以及血液凝固、炎症和创伤愈合等生理和病理过程中起到重要作用。我们制备了表面带正电荷的纳米金粒子。实验发现单链DNA(一种聚阴离子)可以通过静电作用引起正电荷纳米金粒子团聚。本文以凝血酶适配体作为模型体系,将纳米金比色法与适配体的分子识别相结合构建测定凝血酶的新方法。实验结果表明游离的凝血酶适配体可以使纳米金粒子团聚,而凝血酶适配体与凝血酶结合后不能使纳米金粒子团聚,且纳米金粒子的团聚程度与凝血酶浓度密切相关。在优化的实验条件下,凝血酶浓度在0.5-400nM范围内与纳米金溶液的吸光度比值(A650/A524)呈良好的线性关系。且裸眼可检测浓度为50nM的凝血酶。本法无需标记、简单、快速,在生物传感中具有很好的应用前景。
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