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随着经济的不断发展,人们的生活水平不断提高,餐厨垃圾的产生日益增多;餐厨垃圾如果处理不当,不仅严重污染环境,而且也造成了大量的资源浪费,为解决这一问题,迫切需要开发出简单有效的对餐厨垃圾资源化利用的方法。在本研究中,利用分子生物学方法,克隆了凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)乳酸脱氢酶基因LDH1,同时克隆了来源于米曲霉(Aspergillus Oryzae)的淀粉酶基因Amy,来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的糖化酶基因Ga,并分别在毕赤酵母中表达。表达了淀粉酶的毕赤酵母,其分泌的淀粉酶酶活在96 h达到最高1.15 U/mL;表达了糖化酶的毕赤酵母,其分泌的糖化酶酶活在72 h达到最高1.06 U/m L;表达了乳酸脱氢酶的毕赤酵母,发酵41.99 g/L的葡萄糖,其最高产乳酸可达27.65 g/L,是理论产值的66%,其中产副产物乙醇5.892 g/L。为了更方便的利用毕赤酵母发酵餐厨垃圾中的淀粉,将淀粉酶、糖化酶和乳酸脱氢酶共表达在一株毕赤酵母中,三基因共表达菌株pagl在YPD培养基中培养,上清中的淀粉酶总酶活在96 h达到最高3.08 U/mL,三基因共表达菌株以40 g/L的淀粉作为唯一碳源发酵,乳酸的最高产量为25.182 g/L,产率为0.63 g/g淀粉,副产物乙醇的产量为6.35 g/L。利用三基因共表达菌株,在不外加商业淀粉酶的情况下,以统合生物工艺的方式发酵餐厨垃圾,其最高乳酸产量为16.8 g/L,是理论产值的48%。