目的：(1)本研究旨在对μ-芋螺毒素-KIIIA的基因工程表达产物Trx-CTX融合蛋白的镇痛效果进行评价。(2)敬钊毒素-III(JzTx-III)的原核表达载体构建及蛋白表达纯化的初步探讨。　　 方法(1)小鼠醋酸扭体模型：将实验动物随机分组，小鼠腹腔注射7mg/kg的Trx-CTX融合蛋白，对照组给予同体积的生理盐水，分别作用不同时间后，腹腔注射0.6％冰醋酸10ml/kg，观察20min内小鼠的扭体反应数，计算小鼠扭体次数抑制率，分析Trx-CTX融合蛋白镇痛作用的时间相关性；将实验动物随机分组，小鼠腹腔注射不同剂量的Trx-CTX融合蛋白，对照组给予同体积的生理盐水，作用45min后，小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸10ml/kg，观察20min内小鼠的扭体反应数，计算小鼠扭体次数抑制率，分析Trx-CTX融合蛋白镇痛作用的剂量相关性；小鼠热板实验：采用热板测痛仪致痛，将预选合格的实验动物随机分组，小鼠腹腔注射10mg/kg Trx-CTX融合蛋白，阴性对照组给予同体积生理盐水，阳性对照组给予10mg/kg盐酸吗啡，分别作用不同时间后，测定各组小鼠热板反应潜伏期，计算痛阈提高百分率，分析Trx-CTX融合蛋白镇痛作用的时间相关性；预选合格小鼠随机分组，小鼠腹腔注射不同剂量的Trx-CTX融合蛋白，作用45min后，测定各组小鼠的热板反应潜伏期，并计算痛阈提高百分率，分析Trx-CTX融合蛋白作用的剂量相关性。(2)人工合成含JzTx-III基因的序列，5端添加KpnI酶切位点，3’端添加TAA终止密码子及EcoR I酶切位点，定向克隆到质粒载体Pet-32a(+)，构建重组融合表达载体Pet-32a(+)-JzTx-III，经过PCR，酶切和测序鉴定正确后，转化大肠杆菌Origami2(DE3);用IPTG诱导表达融合蛋白，对诱导表达的变量（初始菌浓度、诱导剂浓度、诱导时间）进行优化，SDS-PAG分析蛋白表达量。　　 结果(1)通过测定不同作用时间，不同剂量的Trx-CTX融合蛋白对小鼠扭体次数的影响，采用SPSS17.0软件分析得到如下结果：TX-CTX融合蛋白能明显减少小鼠扭体反应次数，计算融合蛋白作用不同时间的扭体次数抑制率得知；融合蛋白作用30min(90.3％);45min(90.9％);60min(89.5％)时，扭体次数抑制率达50％以上，认为有镇痛效果；作用45min时，扭体次数抑制率最高；Trx-CTX融合蛋白剂量>3mg/kg时，P<0.05，对照组和实验组差别有统计学意义，融合蛋白剂量>5mg/kg时，扭体次数抑制率>50％，有镇痛效果；Trx-CTX融合蛋白在小鼠热板测痛模型上能明显缩短小鼠热痛潜伏期，表现出显著的镇痛效果，作用45 min时镇痛效果最好；剂量为5 mg/kg,10 mg/kg、15 mg/kg时，小鼠痛阈提高百分率分别为10.4％、31.％、52％。(2)重组表达载体Pet-32a(+)-JzTx-III经PCR，酶切和测序分析，证实构建正确：JzTx-III在Origami2(DE3)中以可溶性蛋白的形式高效表达；融合蛋白在IPTG浓度为0.3mmol/L，初始菌浓度为OD600=0.8，16℃表达16h可获得最大表达量；纯化后获得的蛋白质纯度高达85％以上。　　 结论(1)在小鼠醋酸扭体模型中，Tx-CTX融合蛋白能显著抑制小鼠醋酸诱导的扭体反应，说明融合蛋白对小鼠由醋酸引起的炎症疼痛有一定的镇痛作用：在热板实验中，融合蛋白能延长小鼠热板潜伏期，提高痛阈百分率，说明融合蛋白对由热引起的疼痛也有一定的缓解作用。(2)成功的构建了原核表达载体Pet-32a(+)-JzTx-III;JzTx-III以可溶性融合蛋白形式在原核表达系统中高效表达。