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目的:建立稳定的犬急性溃疡性结肠炎模型,评价试制Ento-Ⅰ结肠溶胶囊治疗犬急性溃疡性结肠炎的临床疗效。方法1.模型的建立:选取16只健康犬,随机分成为对照组和3个不同浓度的醋酸组,每组4只,雌雄各半,注射犬眠宝麻醉后,醋酸组分别灌注4%、7%和10%的醋酸2mL/kg,对照组不进行麻醉。直接直肠灌注相应剂量的无菌生理盐水;用药后第1 d、3 d、7 d观察各组排便情况,并用电子内窥镜观察试验犬结肠黏膜的损伤程度;于第7 d牺牲实验犬,取病变结肠做组织切片观察。2.给药方法:选取相同品系的16只成年犬,造模成功后随机分为模型组、Ento-Ⅰ结肠溶胶囊正常剂量组、Ento-Ⅰ结肠溶胶囊2倍剂量组、阳性药物组(柳氮磺胺吡啶结肠溶胶囊),每组4只,雌雄各半。空腹给药,模型组灌喂淀粉结肠溶胶囊2粒/kg体重,正常剂量组灌喂Ento-Ⅰ结肠溶胶囊2粒/kg体重,两倍量剂量组灌喂4粒/kg体重,阳性药物组灌喂柳氮磺胺吡啶结肠溶胶囊2粒/kg体重(下文皆称阳性药物组)。试验期间所有试验动物,单笼饲养,每日提供同等量的食物和饮用水。3.实验室检测指标及疗效判断:造模前一天和给药后1 d、3 d、7 d分别检测实验动物的血细胞数、全套生化指标、C-反应蛋白,统计分析数据。给药后1 d、3 d、7 d分别用动物专用内窥镜观察实验犬结肠黏膜的损伤情况,并同时检查其大便隐血情况。7 d后解剖各组实验犬,并取结肠组织固定,制作病理切片观察结肠损伤程度,分别进行黏膜损伤评分。根据粪便性状、大便隐血、内窥镜观察及实验室检查,综合判定Ento-Ⅰ结肠溶胶囊对犬急性结肠炎的疗效。结果1.急性结肠炎动物模型:灌注4%醋酸的犬,均出现短暂的稀便,病理切片观察只有轻微炎性细胞浸润;灌注10%醋酸的犬,炎症反应过于强烈导致肠穿孔和死亡;灌注7%醋酸的犬,粪便性状及结肠内窥镜检查均显示明显的结肠炎症状,3 d后出现溃疡灶,7 d后可见溃疡灶脱落,组织学检查发现溃疡灶周围有明显的炎性细胞浸润,随着时间的推移炎性细胞浸润明显减少,成纤维细胞增生。结果表明,直肠灌注7%醋酸能成功稳定诱导犬急性溃疡性结肠炎症。2.Ento-Ⅰ结肠溶胶囊治疗犬急性结肠炎的疗效:临床观察结果:给药后1 d试验犬烦躁不安,频频回头观腹,少部分用嘴啃咬狗笼,发出疼痛叫声,里急后重,内窥镜检查结肠黏膜凸凹不平,黏膜出血、水肿、点状糜烂、溃疡;给药后3 d,Ento-Ⅰ结肠溶胶囊两倍剂量组,大便成糊状,潜血实验检测为强阳性,内窥镜检查结肠黏膜水肿减轻,溃疡减少;给药后第7 d,大便基本成形,未见带血,潜血实验为阳性,内窥镜检查结肠黏膜渗出物吸收,肠黏膜色泽变得苍白,黏膜正常光泽未完全恢复,但结肠黏膜表面光滑,未见溃疡性病灶。C-反应蛋白(CRP)结果:造模成功后1 d,CRP为103.775±16.747mg/L,以后随时间的延长而逐渐降低,到第7 d为36.425±8.764mg/L。给药后第7 d,Ento-Ⅰ结肠溶胶囊正常用量、两倍剂量组CRP分别为18.450±7.303mg/L、7.975±2.425mg/L,阳性药物组CRP为14.500±2.783mg/L,表明:两倍量Ento-Ⅰ结肠溶胶囊治疗后CRP恢复到正常范围,且差异显著低于此时的正常剂量组与阳性药物组。给药后第7 d,两倍剂量组和阳性药物组白细胞总数下降至正常范围,两倍剂量组为10.600±2.688,与正常剂量组、阳性药物组相比较,差异极显著。试验期间所有试验动物的全套生化指标除尿素氮意外均正常,即试验药物对试验犬肝肾功能无影响。观察给药后3 d、7 d的组织学切片。两倍剂量组,给药后3 d,结肠黏膜层有溃疡性病灶,并伴有炎性细胞的浸润,但给药后7 d,溃疡灶消失,炎性细胞减少,成纤维细胞增生,表明Ento-Ⅰ结肠溶胶囊两倍剂量组能修复急性结肠炎的溃疡面;正常剂量组,给药后3 d,黏膜层出现大量局灶性溃疡,且有大量炎性细胞浸润至肌层,淋巴细胞增多;给药后7 d,肠黏膜上皮细胞肿胀,炎性细胞减少,表明炎症还未消失。阳性药物组,给药后3 d,黏膜层与正常剂量组一样出现局灶性溃疡,且有大量炎性细胞浸润至肌层,给药后7 d,炎性细胞溃疡病灶减少,肠黏膜上皮细胞肿胀,表明炎症还未完全修复。结论1.采用7%的醋酸直肠灌注15 s能制作理想的稳定的犬的急性溃疡性结肠炎模型。2.试验7d内,试制Ento-Ⅰ结肠溶胶囊治疗冰醋酸诱导的犬的急性溃疡性结肠炎疗效肯定,其效果优于正常药物剂量组,阳性药物柳氮磺吡啶组。3.试验7d内,试制Ento-Ⅰ结肠溶胶囊用量加倍在未对犬的肝肾功能造成损伤。