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第一部分Ace-AMP1的体外抗真菌功能和应用 Ace-AMP1是一种来自于洋葱(Allium cepa)种子的强效抗真菌蛋白,其一级序列同植物脂质转移蛋白具有较高的相似性。过表达Ace-AMP1的转基因植物对一些病原真菌的抗性有所增强,但该蛋白的体外高表达和应用尚未报道。在本课题中,Ace-AMP1以融合蛋白的形式在大肠杆菌(Escherichia coli)原核系统中得到高表达,并且纯化到的融合蛋白能有效抑制多种植物病原真菌的生长,特别是番茄早疫病菌(Alternaria solani),棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.vasinfectum)和棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)等。同时发现棉花黄萎病菌被Ace-AMP1抑制的同时还伴随着不正常的菌丝增多现象,但对于棉花枯萎病菌和番茄早疫病菌则没有观察到菌丝增多的现象,说明对于不同的真菌,Ace-AMP1的作用方式可能不同。在番茄(Lycopersicon esculentum)叶片上的实验结果表明该融合蛋白能增强番茄对早疫病的抗性,可作为一种有效地杀真菌剂使用。 第二部分拟南芥PARP蛋白的生化研究 由聚ADP核糖聚合酶(poly(ADP-ribose) polymerase,PARP)催化的聚ADP核糖化反应是一种重要的蛋白翻译后修饰。在动物中,PARP的研究较为深入,其在DNA修复、染色质结构重塑、基因转录、细胞周期和细胞凋亡等过程中均起到了重要作用。而在植物中,PARP的功能尚不清楚。在这里,我们对拟南芥的PARP1和PARP2的活性进行了确认。我们的结果为植物中PARP参与DNA修复过程提供了有力证据。