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目的:色素上皮衍生因子具有抗肿瘤生长和抗血管生成等多种生物潜能。我们通过体外实验,研究PEDF对人食管癌细胞及脐静脉内皮细胞的生物活性,希望探索食管癌基因治疗新方法,为促进PEDF的转化医学研究提供理论依据。方法:将腺病毒介导的色素上皮衍生因子(Ad-PEDF)体外转染人胚肾293T细胞扩增,收集细胞裂解液,用TCID50法测定细胞裂解液病毒滴度。将扩增的重组腺病毒转染293T细胞、人食管癌109细胞和脐静脉内皮细胞,通过半定量PCR和Western-Blot鉴定PEDF基因表达情况。用Transwell实验模型研究PEDF抑制人食管癌109细胞增殖、迁移,及脐静脉内皮细胞迁移。通过人脐静脉内皮细胞诱导毛细血管样管腔形成实验观察PEDF对内皮细胞的抑制活性。通过CCK8细胞增殖活性检测评估PEDF对人食管癌细胞、脐静脉内皮细胞增殖活性的影响。通过流式细胞仪分析PEDF诱导食管癌细胞发生凋亡的活性。结果:重组腺病毒Ad-PEDF在293T细胞内大量稳定扩增,Ad-PEDF的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,能观察到分子量约1.25kb的目的条带;Western blot结果显示PEDF蛋白在转染了重组腺病毒的人食管癌109细胞、脐静脉内皮细胞中稳定表达。Transwell结果表明:与阴性对照组(携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒Ad-GFP)相比,Ad-PEDF组能明显抑制食管癌细胞的侵袭、迁移及脐静脉内皮细胞的迁徙,结果有明显统计学意义(P<0.01)。脐静脉内皮细胞诱导的体外新生血管形成实验表明:Ad-PEDF组抑制血管管腔形成的数目明显高于Ad-GFP组,抑制作用随着滴度增加而增强,结果有统计学意义(P<0.05)。CCK8细胞增殖活性检测显示:与Ad-GFP组相比,Ad-PEDF组能明显抑制食管癌109细胞、脐静脉内皮细胞的增殖,且抑制脐静脉内皮细胞增殖的作用更强,结果具有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪凋亡检测结果分析:不同滴度的重组病毒转染食管癌109细胞后,病毒滴度为1.5×106PFU/ml时,Ad-PEDF组和Ad-GFP组诱导ECa109凋亡率无差别;病毒滴度高于1.5×106PFU/ml,随着滴度增加Ad-PEDF组诱导ECa109凋亡率高于Ad-GFP组,结果有统计学意义(P<0.01);而阴性组不同滴度Ad-GFP诱导ECa109凋亡率无统计学差异。结论:该实验数据初步证明PEDF能抑制食管癌细胞增殖、侵袭及迁移,并诱导食管癌细胞发生一定凋亡。同时,PEDF能明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及体外血管管腔形成。基于以上结果,推测PEDF抗食管癌生物活性可能是通过抑制内皮细胞增殖、迁移而实现。PEDF强大的抗血管生成和抑瘤活性使它成为肿瘤治疗潜力分子,但应用于临床治疗其有效性、安全性(包括合适的载体途径)都需更多研究进一步证实。