论文部分内容阅读
本文对Ankrod17和Ndfip1调控RLR介导天然免疫信号转导分子机制进行了研究。RIG-Ⅰ(retinoic acid-inducible gene-Ⅰ)-like受体(RLRs)，如RIG-Ⅰ，MDA5(melanoma differentiation-associated gene5)和它们的接头分子VISA(virus-induced signaling adaptor)，负责识别细胞质中的外源RNA分子并激活天然免疫反应。我们发现具有ankyrin repeat结构域的蛋白ankrd17能够与RIG-Ⅰ，MDA5和VISA发生相互作用并增强RLR介导的免疫反应。过表达ankrd17会增强RLR信号通路介导的IRF-3和NF-κB的激活并促进IFN-β的转录。我们还发现ankrd17能够促进有poly I：C，流感病毒RNA和仙台病毒介导的天然免疫信号转导。基因敲除ankrd17会抑制RLR信号通路的激活。进一步研究表明ankrd17可以增强RIG-Ⅰ，MDA5与VISA的相互作用，进而促进RLR通路的信号转导。在这一过程中，ankrd17中的ankyrin repeat结构域对ankrd17与RIG-Ⅰ的相互作用和ankrd17的功能起重要作用。另外，我们发现Ndfip1(Nedd4 fimily interacting protein1)对RLR通路的信号转导具有显著的抑制作用，过表达Ndfip1会抑制VISA、poly I：C，流感病毒RNA和仙台病毒介导的天然免疫信号转导，基因敲除Ndfip1则会增强以上刺激介导的RLR通路的激活。共表达Ndfip1和VISA会导致VISA发生明显的泛素化，在用放线菌酮处理的情况下，表达Ndfip1的293T细胞中VISA含量比对照组明显降低。进一步试验发现Ndfip1能够促进Nedd4泛素连接酶家族成员Smurf1与VISA的相互作用和对VISA的泛素化并导致VISA的降解。在这一过程中，Ndfip1的PY结构域对促进VISA和Smurf1相互作用是必需的。