高产木聚糖酶菌株的诱变选育及酶学性质研究

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用紫外线照射的方法对出发菌株Aspergillus niger M1进行处理后,从中筛选到了一株木聚糖酶活力比较高的突变株A. niger J506,传代10次后产酶能力仍然稳定性良好。 经过正交试验设计,得出突变株A. niger J506产木聚糖酶最佳的工艺条件为:主碳源浓度4%、麸皮与玉米芯的比例为5:5、辅加碳源葡萄糖的浓度是0.1%、辅加氮源草酸铵的浓度是2.0%,培养基初始pH为5.0,250ml三角瓶的装液量为100ml。 聚丙烯酰胺凝胶电泳研究发现,突变株和出发菌株的蛋白质种类有较大不同。尤其是在木聚糖酶谱带检测中发现,突变株发酵液中有三种类型的木聚糖酶,而出发菌株中只有两种类型的木聚糖酶,并且通过考马斯亮蓝G250染色和琼脂糖板上的透明圈发现,突变株中第三种类型的木聚糖酶不仅表达量很大,活力也很高。 出发菌株木聚糖酶最适作用pH是5.4;突变株木聚糖酶的最适作用pH是6.0。出发菌株在pH7.0到10.0之间木聚糖酶的稳定性较好,而突变株在pH6.0到10.0之间木聚糖酶的稳定性较好 突变株和出发菌株的木聚糖酶最适作用温度均为52℃;在20℃到50℃之间突变株和出发菌株木聚糖酶稳定性比较好,二者的半失活温度都在55℃左右。
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