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研究背景和目的癌症极大地威胁着人类的生存和健康。胃癌是世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。目前临床上针对胃癌的治疗方法主要有手术,放射疗法,化学疗法和生物靶向疗法等。由于胃癌早期检出率低,大多数患者确诊时已是晚期,失去手术切除的机会,药物化疗是晚期胃癌和根除性手术术后复发的主要治疗手段。常用的胃癌化疗药物有铂类、氟尿嘧啶类、紫杉类、拓扑异构酶Ⅰ抑制剂等。上述药物组成的多药联合化疗方案,与传统药物联合化疗相比大大提高了疗效和患者生存率。尽管近年来胃癌的临床诊断和治疗都有了很大进步,但患者五年存活率依旧很低。5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)是治疗胃癌的基础药物之一,通过干扰DNA合成发挥抗癌作用,然而和其他抗癌药物一样,多药耐药和不可忽视的毒副反应限制了其在临床中的应用。因此寻找有效的增效减毒联合化疗药物,具有重要的临床意义。质子泵抑制剂是治疗胃酸分泌过多相关疾病的常用药物,近年来研究表明,质子泵抑制剂能够提高化疗药物敏感性,具体作用机制并不完全明确。有报道奥美拉唑(Omeprazole, OPZ)联用止吐剂能够更好地减轻5-Fu、顺铂导致的胃肠道反应。因此,本课题我们选取了奥美拉唑,在细胞水平上研究了和5-Fu合用后对人胃癌细胞株SGC-7901的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用机制。实验方法常规体外培养胃癌SGC-7901细胞系。采用MTT法及克隆形成实验检测奥美拉唑和5-Fu单用及合用对SGC-7901细胞的生长抑制作用。采用Hoechst 33342核酸染色实验显微镜下观察细胞凋亡形态变化；采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡数目。采用碘化丙啶(PI)染色法通过流式细胞仪检测奥美拉唑和5-Fu单用及合用对SGC-7901细胞的周期分布影响。采用划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测奥美拉唑和5-Fu单用及合用对SGC-7901细胞迁移能力的影响。采用Transwell细胞侵袭实验检测奥美拉唑和5-Fu单用及合用对SGC-7901细胞侵袭能力的影响。采用Western blotting法检测相关蛋白表达水平。实验结果1.奥美拉唑和5-Fu合用24h后对SGC-7901细胞的生长抑制率低于单用5-Fu,但合用48h、72h后抑制率显著高于单用5-Fu,40 ug/ml奥美拉唑与10,20,40ug/ml 5-FU合用48h后对细胞生长抑制作用均呈现协同作用；2.奥美拉唑和5-Fu合用能将SGC-7901细胞阻滞于Go/G1期,该阻滞作用与降低cyclinD1、yclinE1、 CDK2蛋白的表达有关；3.与单用5-Fu相比,奥美拉唑和5-Fu合用能更显著诱导SGC-7901细胞凋亡,呈现明显的染色质凝集、边缘化或核膜破裂的现象,早期凋亡细胞数显著增加；4. Western blotting实验结果显示与单用5-Fu相比,奥美拉唑和5-Fu合用后Bax/Bcl-2的比率提高,PARP蛋白的裂解水平增加,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达明显增加；5.奥美拉唑和5-Fu合用能抑制SGC-7901细胞的迁移能力；6.奥美拉唑和5-Fu合用能抑制SGC-7901细胞的侵袭能力；7.奥美拉唑和5-Fu合用对SGC-7901细胞的迁移、侵袭能力抑制作用与抑制MMP-2活性形式的蛋白表达有关。实验结论奥美拉唑和5-Fu合用可通过诱导细胞凋亡、诱发Go/G1期阻滞对SGC-7901细胞的增殖发挥协同抑制作用,通过抑制活性MMP-2的表达发挥抑制迁移、侵袭作用,且合用效果明显优于单用。