【摘 要】
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马铃薯早疫病是全球马铃薯生产上的重要病害,在世界各地马铃薯种植区均有发生。其致病菌为茄链格孢（Alternaria solani）,主要侵染马铃薯叶片,其次是叶柄、茎和块茎,不仅使马铃薯大面积减产,还可以引起贮藏期薯块腐烂,导致品质下降。堪称“真菌护甲”二羟萘（DHN）黑色素在植物病原真菌的致病性、抗逆、发育方面上起着重要作用。Cmr1是真菌DHN类型黑色素生物合成途径上的一个重要转录因子,调控途
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马铃薯早疫病是全球马铃薯生产上的重要病害,在世界各地马铃薯种植区均有发生。其致病菌为茄链格孢（Alternaria solani）,主要侵染马铃薯叶片,其次是叶柄、茎和块茎,不仅使马铃薯大面积减产,还可以引起贮藏期薯块腐烂,导致品质下降。堪称“真菌护甲”二羟萘（DHN）黑色素在植物病原真菌的致病性、抗逆、发育方面上起着重要作用。Cmr1是真菌DHN类型黑色素生物合成途径上的一个重要转录因子,调控途径上关键酶的表达。本研究首先通过比对马铃薯早疫病菌基因组序列,鉴定并克隆到一个Cmr1同源基因,命名为Asmr1。Asmr1全长3084 bp,包括3个内含子,其编码蛋白含有一个Cys2His2锌指结构域和一个真菌特有的Zn（II）双核簇结构域。系统进化树分析发现Asmr1与Alternaria brassicicola的Cmr A同源关系最近。在酵母中验证了Asmr1具有转录激活活性。实时荧光定量PCR检测Asmr1在病原菌侵染的早期（前12 h内）上调表达。其次,通过聚乙二醇（PEG）介导的原生质体转化方法,敲除基因Asmr1,经PCR和Southern印迹杂交鉴定正确的敲除转化子。对基因Asmr1进行了回补实验,经PCR和RT-PCR鉴定到了回补体。最后,对转化子进行了表型分析,发现基因Asmr1缺失后对细胞壁胁迫和杀菌剂方面变得更加敏感。基因Asmr1缺失后,菌落的颜色发生变化,不能黑化,呈现橙色或淡粉色,分生孢子颜色变浅且伴随有结构异常,菌丝的颜色变浅且伴随有细胞壁部分缺失的现象。而且,基因Asmr1缺失后,转化子的黑色素含量下降、致病力上调。本研究结果为解析马铃薯早疫病菌Asmr1的功能提供研究基础。
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