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目的:研制新型GnRH疫苗,并探讨其对雄性SD大鼠的去势效果。方法:(1)在固相多肽合成仪上合成GnRH并列体(GnRH-tandem,GnRH2),高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析其纯度,质谱检测其分子量。然后对GnRH2进行MAP(multiple antigen peptide,MAP)修饰(GnRH2-MAP)并检测其纯度。(2)将18~20d的雄性大鼠随机分为GnRH2-MAP免疫组,GnRH2免疫组和对照组,每组30只,免疫组注射100μg/只疫苗,对照组注射50%佐剂生理盐水溶液,每隔2W加强免疫一次,共免疫3次。(3)自免疫开始,每2W采集一次样品,每次5只,收集血液并分离出血清,记录体重、睾丸重量及体积大小,取少量睾丸组织置于4%多聚甲醛溶液内固定。(3)采用酶联免疫分析法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中GnRH抗体及睾酮水平。将睾丸组织进行常规石蜡包埋、苏木素-伊红(Haematoxylin-Eosin,HE)染色,光学显微镜下观察并拍照。结果:(1)GnRH2-MAP纯度高,达到95%以上。(2)免疫后,免疫组体重与对照组相比无显著差异(P>0.05);免疫组大鼠血清GnRH抗体较对照组显著升高(P<0.05),睾酮浓度显著降低(P<0.05);但GnRH2-MAP免疫组大鼠的抗体自首次免疫后呈现著上升趋势,并在个别时期显著高于GnRH2组(P<0.05),GnRH并列体免疫组在个别时期睾酮浓度与对照组无显著差异(P>0.05)。免疫组睾丸重量及体积均显著小于对照组(P<0.05)。(3)睾丸组织切片显示:GnRH2-MAP组大鼠的生精小管发生萎缩,管内结构疏松,细胞层数及种类极少,精原细胞分化不明显;GnRH2免疫组生精小管管腔变大,管内细胞层数较少,具有少量精子;对照组生精小管发育良好,结构紧密,细胞层数多,精原细胞细胞分化明显,管腔内含有大量精子。结论:成功合成高纯度的GnRH2-MAP,抑制大鼠的生殖功能,达到去势的效果,表明GnRH2-MAP是一种有效的免疫原。