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临床上大多选择使用抗生素控制感染,最先应用于人类细菌感染,随后人们发现应用于动物也能取得良好的疗效,应用也越来越普遍,随之细菌耐药性越来越强,从而使治疗细菌感染越来越困难。大肠杆菌是临床上引起动物腹泻、败血症等疾病的重要的病原菌之一,其携带的纤毛粘着抗原如F17能在小肠粘膜上起定居作用,易引起犊牛腹泻,奶牛乳房炎、子宫炎等致死性疾病,给广大养殖户来巨大损失。临床上使用抗生素一般基于最小抑菌浓度(MIC),且多单独用药,使得细菌极易获得耐药性。随着耐药突变选择窗(MSW)理论研究的深入,联合不同抗菌机理的抗生素进行临床治疗可降低细菌耐药性的产生。本研究就是基于MSW理论,联合头孢噻肟和恩诺沙星,结果显示头孢噻肟联合恩诺沙星能够缩小甚至关闭其单药的MSW,防止耐药的产生。为探讨联合用药对携带F17毒力基因牛源性大肠杆菌耐药突变选择窗的影响,从63株致病性牛源大肠杆菌受试菌株中筛选出了 11株携带F17毒力基因的菌株。通过Kirby-Bauer药敏试验测定了 19种抗生素的敏感性,PCR方法检测了 21个耐药基因。实验结果显示药物耐药现状十分严重:11株受试菌株全部呈现多重耐药,少则4重耐药,多则达到17重耐药,其中链霉素(S)耐药率最高为81.8%,多粘菌素(PB)耐药率最低为0%,其次氨曲南(AZT)耐药率也仅为18.2%;而氨苄西林(AM)、阿莫西林(AMX)、头孢氨苄(CL)、庆大霉素(GM)、多西环素(DOX)、土霉素(OT)、氟苯尼考(FFC)、甲氧苄啶(SXT)、环丙沙星(CIP)、洛美沙星(LMF)、恩诺沙星(ENR)、诺氟沙星(NOR)耐药率都在50%以上,头孢克肟(CFX)、头孢曲松(CRO)、头孢噻肟(CTX)、卡那霉素(K)四种抗菌药物耐药率都在50%以下。而对于耐药基因的检测结果显示tetA、tetB、GyrA检出率为100%,blaTEM、parC检出率为90.90%,对菌株携带多重耐药基因统计发现其中6株携带五种类型的耐药基因,1株携带四种类型耐药基因,4株携带三种类型耐药基因,就单个耐药基因来说,tetA(100%)、tetB(100%)、GyrA(100%)检出率最高,blaTEM(90.90)、parC(90.90)次之,aacC2(63.64)也在 50%以上,其余耐药基因检出率都较低。之后又采用微量稀释法和棋盘法测定了 CTX和ENR单用的MIC值和联合MIC值。结果显示联用CTX和ENR时比单用CTX和ENR时某些菌株的MIC有所下降,MIC50都有所下降,但是MIC90没有下降。后又采用琼脂二倍稀释法测定头孢噻肟联合恩诺沙星对11株携带F17毒力基因大肠杆菌的单用及联用的耐药突变度(MPC),计算耐药指数(SI)。结果显示:当CTX和ENR联合后,CTX的MPC90降到了256mg/L,SI下降了 4倍,MPC90/MIC90为1,即联合ENR后能使CTX的MSW完全关闭;同样 ENR 的 MPC90 降到了 256mg/L,SI 下降了 2 倍,MPC90/MIC90 为 2,MSW 变窄,即联合CTX后能使ENR的MSW减小。研究表明了,头孢噻肟联合恩诺沙星能够缩小甚至关闭其单药的MSW,防止耐药的产生。