石杉碱甲提取分离工艺的研究

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中草药中有效成分的提取分离在中药现代化道路上起着至关重要的作用。本文研究了我国传统中药蛇足石杉和乌药有效成分提取的方法,并对蛇足石杉中石杉碱甲的进一步分离进行了探讨。采用高效液相色谱对石杉碱甲进行分析,色谱条件为:流动相:甲醇:0.08mol/L醋酸铵缓冲液(40:60);检测波长:308nm;进样量:10μl;流速:1ml/min;柱温:室温。建立了石杉碱甲的标准曲线,在0.5μg/ml—16.0μg/ml的范围内,石杉碱甲浓度与吸收峰面积具有良好的线性关系,线性关系式为:Y=21303.70931 X?12102.70945,关联系数R=0.99911。通过对各种提取方法的比较,最后确定用微波萃取法对石杉碱甲进行提取。在单因素实验的基础上,选定盐酸浓度、浸提时间和液料比三个因素,以石杉碱甲的回收率和纯度为响应值,利用响应面法,对提取的工艺条件进行优化。三个因素的最优水平分别为:盐酸浓度2.03%,浸提时间20.04h,液料比19.22。理论收率和纯度分别为:85.67%和3.04%。在优化的条件下进行验证试验,得到的石杉碱甲的收率和纯度分别为:85.31%和3.05%。采用硅胶色谱柱法对提取的石杉碱甲粗品进行分离,并对硅胶色谱柱的流动相和上样量进行优化,优化结果为:流动相4%甲醇的环己烷溶液,上样量8mg/ml硅胶,流速3ml/min。在上述条件下,石杉碱甲的收率和纯度分别为:77.65%和48.13%。通过与水蒸气蒸馏法和溶剂提取法的比较,最终确定采用超临界萃取法对乌药挥发油进行提取,并采用正交试验对超临界萃取法的工艺参数进行优化,正交试验结果表明,各因素的主次顺序为萃取压力>分离温度>分离压力>萃取温度,优化后各因素的水平分别为:萃取压力30MPa,萃取温度40℃,分离压力4MPa,分离温度50℃。在优化的水平上进行实验,挥发油出油率为4.88ml/100g乌药。
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