论文部分内容阅读
第一部分布鲁菌BvfA蛋白的原核表达及纯化目的:通过原核诱导表达,纯化并制备出重组蛋白布鲁菌毒力因子A（Brucella virulence factor A,BvfA）,便于以后对BvfA蛋白晶体结构进行解析、研究其与宿主之间的作用机制和筛选抗体。方法:在NCBI上查找BvfA基因序列,设计引物,扩增BvfA基因序列并将其插入到V29H（p ET30a改造系列）表达载体上,V29H表达载体含有晶体伴侣麦芽糖结合蛋白（maltose-binding protein,MBP）有利于促进蛋白的表达和结晶。将重组质粒转化到BL21（DE3）和Rosetta感受态细胞中诱导其表达,进行蛋白纯化,纯化的产物经SDS-PAGE电泳进行鉴定。结果:BvfA基因序列全长为336 bp,BvfA蛋白为11 k Da,MBP标签约为42 k Da。纯化出了MBP-BvfA蛋白。结论:构建出了原核表达载体V29H-BvfA,纯化了MBP-BvfA蛋白。第二部布鲁菌病患者的临床特征分析目的:回顾性评估安徽省布鲁菌病患者的流行病学、临床和实验室资料。方法:从安徽医科大学第一附属医院电子医疗系统收集2012年1月至2021年3月收治的109例布鲁菌病患者的临床资料。根据有无菌血症和布鲁菌病的三个阶段对临床资料进行分组和比较。结果:109例布鲁菌病患者中最常见的症状是发热（89.0%）,其次是寒颤（52.3%）、关节痛（48.6%）和体重减轻（30.3%）。实验室检查结果表现为贫血（65.1%）、C-反应蛋白（CRP）（91.7%）、红细胞率沉降（ESR）（86.2%）、天冬氨酸转氨酶（AST）（40.4%）和乳酸脱氢酶（LDH）（43.1%）增高。菌血症组发热（96.1%）、关节痛（58.8%）、厌食（35.3%）、白细胞减少（31.4%）和AST增高（51.0%）发生率,和非菌血症症相比均较高。此外,菌血症组的LDH中位水平（332.0 mg/L,IQR,209.0-553.0）高于非菌血症组,然而,菌血症组的白蛋白水平（36.0 mg/L,IQR,33.9-38.2）较低。布鲁菌病急性期发热百分比（94.9%）和中位LDH水平（316.0 U/L（IQR,218.0-517.5））高于亚急性期发热百分比（72.0%）和中位LDH水平(209.0 U/L（IQR,162.0-276.0）。结论:布鲁菌病已成为安徽省重要的公共卫生问题,是一种临床表现多样的疾病。我们的数据显示,原因不明的发热、关节痛、AST和LDH增高应考虑为鲁氏菌病菌血症,以便及时进行早期治疗干预。