趋化因子CXCL10对同种异体心脏再次移植急性排斥反应的影响

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目的:  γ干扰素诱导的蛋白10(IP-10/CXCL10)在器官初次移植排斥反应中起着重要作用,但其在再次移植中的作用仍不明确,本文主要研究趋化因子CXCL10是否能够对再次移植急性排斥反应的产生影响;由于记忆性T细胞的存在,心脏再次移植排斥反应对传统免疫抑制剂不敏感,因此,在再次移植基础上应用特异性CXCL10抗体来观察其是否能够减轻再次移植物炎症细胞浸润,延长心脏再次移植的存活时间。  方法:  实验一、对照组(HTx):仅接受一次腹腔异位心脏移植;实验组(HRTx):接受颈部心脏移植术后第40天再次行腹部心脏移植,两组术后均不做任何处理;通过qRT-PCR、ELISA等方法比较CXCL10在两组之间表达量的区别,以及其对生存期、移植物病理改变的影响。  实验二、对照组(HRTx+NS);再次心脏移植术后,腹腔注射与抗体同等剂量的生理盐水(Normal Saline),实验组(HRTx+CXCL10Ab):再次移植术后,移植第-1天(以移植当天为第0天)腹腔注射以150μg/kg剂量CXCL10特异性抗体,随后每隔2天腹腔注射相同剂量CXCL10抗体直至移植物完全排斥;通过病理检测、qRT-PCR、ELISA、流式细胞术研究CXCL10抗体在再次心脏移植排斥反应中的作用。  结果:  实验一  1、HRTx组中CXCL10外周血清浓度高于HTx(P<0.05),基因表达在HRTx组中也有显著上升(P<0.01);  2、初次心脏移植物(HTx)平均存活时间6.33天,再次心脏移植物(HRTx)平均存活时间3.5天,再次移植存活期低于初次移植(P<0.001);  3、HTx组ISHLT评分3.27±0.24,HRTx组ISHLT评分为4.0,统计两组数据,具有统计学差异(P<0.05);  4、HRTx组中脾脏CD4+T细胞比例高于HTx组(P<0.01);CD8T细胞比例也升高(P<0.001)。  实验二  1、HRTx+CXCL10Ab组中CXCL10外周血清浓度低于HRTx+NS组(P<0.01),基因表达在抗体应用后也有显著下降(P<0.01);  2、HRTx+NS平均存活时间3.5天(n=6),HRTx+CXCL10Ab组平均存活期11.3天(n=6,P<0.001);  3、HRTx+NS组ISHLT评分4.0,HRTx+CXCL10Ab组ISHLT评分为1.72±0.34,统计两组数据,具有统计学差异(P<0.001);  4、与HRTx+NS组相比,HRTx+CXCL10Ab组中促炎因子IL-2和IFN-γ的血清浓度以及基因表达均降低,而抑炎因子TGF-β血清浓度和基因表达升高,而IL-10在两组之间无统计学差异;  5、HRTx+CXCL10Ab组中脾脏CD4+T比例低于HRTx+NS组(P<0.001);CD8+T细胞比例低于HRTx+NS(P<0.001);  6、HRTx+CXCL10Ab组,记忆性CD8+T细胞的比例HRTx+NS组下降(P<0.001);记忆性CD4+T细胞在应用抗体治疗,虽有少许下降,但无统计学意义。  结论:  1.在心脏再次移植中,CXCL10表达量的增加促进心脏移植物的功能丧失,加重移植物内炎症细胞的浸润程度,缩短心脏移植物生存期;  2.心脏再次移植应用CXCL10抗体治疗后,CXCL10表达量的下降减轻移植物炎症细胞浸润程度,延长心脏再次移植物的生存期,抑制移植物T细胞比例的增加以及减少脾脏记忆性CD8+T细胞的比例,对记忆性CD4+T细胞无明显效果,同时,CXCL10抗体能够下调IL-2和IFN-γ等促炎因子的表达,上调TGF-β的表达。
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