甲真菌病实验室诊断的研究及其患者外周血淋巴细胞免疫表型的分析

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甲真菌病是真菌感染甲板或甲下组织疾病.传统的实验室诊断主要依靠真菌直接镜检和真菌培养,但两种方法都存在一定的局限性.虽传统的甲组织病理学能弥补前两者的不足,但因制片时间较长,又限制了在临床上的应用.因此,为提高甲真菌病的诊断率,我们寻找了一种快速准确的实验室方法.甲真菌病是目前发病率较高的浅部真菌病,该病对患者的身心健康及生活质量的影响越来越受到了人们的关注.以往学者对浅部真菌病的发病机理进行了大量的研究,在免疫学方面较统一的认识是细胞免疫功能的降低.该试验应用流式细胞术(FCM)在甲真菌病患者的体液免疫、细胞免疫方面进行了探讨.试验对60例拟诊为甲真菌病的患者,观察临床分型和特征,对病甲分别采用10﹪氢氧化钾(KOH)直接镜检、真菌培养、20﹪氢氧化钠(NaOH)溶甲集菌、改良病理法进行检测,对其阳性率进行对比研究;同时取其24例甲真菌病患者及20例健康志愿者的外周血,用流式细胞仪对淋巴细胞免疫亚型进行测定.研究结果表明:四种检测甲真菌的实验室方法阳性率分别为直接镜检法63.3﹪,溶甲集菌法95.0﹪,真菌培养法30.0﹪,改良病理法83.3﹪.20﹪NaOH溶液溶甲集菌法阳性率最高.改良病理法用20﹪NaOH溶解病甲并置于65℃恒温箱中软化只需10分钟,而传统病理法软化病甲需用3~7天.甲真菌患者外周血Ts淋巴细胞明显高于健康对照组,总T淋巴细胞、Th淋巴细胞、Th/Ts、B淋巴细胞、NK细胞与对照组变化不明显.该试验为提高甲真菌病的镜检率提供了有效的方法,并对传统病理法在软化病甲方面进行了重大的改良;对进一步研究细胞免疫在甲真菌病中的作用有较为重要的意义,也为甲真菌病的治疗提供了新的思路.
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