七鳃鳗是迄今发现的海洋生物中最原始的无颌类脊椎动物。由于其在进化地位上的特殊性,长久以来,七鳃鳗都具有极高的研究价值。蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一种磷脂依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,本论文研究的蛋白激酶C-δ(protein kinase C,PKC-δ)是新型PKC家族中的一员。PKC-δ在动物体内广泛表达,具有多种重要的细胞功能,在细胞增殖、死亡、免疫,尤其在细胞凋亡中扮演重要角色。PKC-δ在人体中的研究较多,但在七鳃鳗中却鲜有报道。对此,本论文对日本七鳃鳗(Lampetra japonica)PKC-δ-like的基因克隆以及功能进行了研究,初步取得了如下研究成果。首先,本论文从日本七鳃鳗髓样组织c DNA文库中成功克隆出长度为1770bp编码为589个氨基酸的PKC-δ-like全长基因。PKC-δ-like同源序列比对分析发现,该基因与其他脊椎动物PKC-δ具有高度同源性。通过选取相关物种构建进化树,对PKC-δ-like序列进行生物信息学分析,发现日本七鳃鳗PKC-δ-like处于脊椎动物进化最低端,符合生物学中低级动物到高级动物渐序进化的客观规律。其次,本论文成功地构建了重组质粒,经原核表达与纯化后获得了可溶性的PKC-δ-like重组蛋白纯品。以纯化的PKC-δ-like重组蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,制备了兔抗日本七鳃鳗PKC-δ-like多克隆抗体。经检测,抗体特异性较好,亲合能力强。实时荧光定量PCR(Realtime-PCR)和Western blot检测结果显示,PKC-δ-like在日本七鳃鳗的髓样组织中表达量最高。激光共聚焦结果表明,日本七鳃鳗PKC-δ-like主要定位于髓细胞的细胞质中。再次,本论文首次利用凋亡诱导剂cis-Diaminedichloroplatinum(CDDP)刺激日本七鳃鳗,发现CDDP刺激后,髓样组织中PKC-δ-like的m RNA水平和蛋白表达水平均有提高,表明日本七鳃鳗PKC-δ-like在髓细胞的细胞凋亡过程中可能扮演重要角色。以上研究为客观评价PKC-δ-like在脊椎动物中的进化以及探明其在细胞凋亡中的作用提供了基础。