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背景和目的:肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)由收缩表型向合成表型转变,并从中膜迁移于内膜大量增殖,是低氧性肺动脉高压(HPH)肺血管结构重建(PVSR)的基本病理变化。PASMCs的增殖加速和凋亡减慢可以视为PVSR血管内膜过度增生的演变核心。以PASMCs增殖和凋亡为切入点,探讨HPH的发病机制,寻求HPH有效防治策略已成为目前研究前沿的重点和热点。有关生长因子、生长因子受体及其信号传导通路在PASMCs的生物学行为异常中的作用研究较为深入。但关于核转录因子如何将这些信号进行整合并启动级联调节反应的研究尚欠缺。Gax基因是近年来发现的调节血管平滑肌细胞生物学行为的核转录因子基因之一。研究证实Gax(growth-arrest homeobox)基因是一个主要存在于心血管系统的同源盒基因,同源盒基因在胚胎发育中调节细胞的生长、分化和迁移。增强Gax基因表达可以抑制心血管平滑肌细胞的增殖并诱导其凋亡。以往的研究侧重于Gax基因在心血管平滑肌细胞增殖和凋亡中的作用,而有关Gax基因在肺动脉平滑肌细胞中的作用研究,目前亦尚欠缺。此外,研究侧重于Gax基因对血管平滑肌增殖的影响,对其诱导细胞凋亡的研究亦显不足。鉴于肺动脉平滑肌细胞与心血管平滑肌细胞的生物学特性具有相似性,我们推测增强Gax基因表达对低氧性PASMCs可能也有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。因此,本实验首先观察正常大鼠PASMCs中是否有Gax基因表达,以及低氧对PASMCs中Gax基因表达是否有影响;其次通过携带Gax基因的重组腺病毒载体转染体外培养的大鼠PASMCs,观察增强Gax基因表达对常氧和低氧条件下PASMCs增殖和凋亡的影响,以及原癌基因和凋亡相关基因表达的变化,探讨Gax基因在低氧性PASMCs增殖和凋亡中的作用和机制。方法:1.采用组织块贴壁法,显微镜观察和α-SM-actin免疫细胞化学方法原代培养和鉴定大鼠PASMCs。2.TR-PCR、免疫细胞化学和Western blot法检测常氧和低氧条件下PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达的变化。