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目的:研究PTBP1在肾癌发生发展中的作用及分子机制。方法:利用组织芯片免疫组化技术观察PTBP1在正常肾组织和肾癌组织中的表达;通过shPTBP1慢病毒干扰PTBP1基因从而构建沉默PTBP1的786-O、ACHN稳转细胞株,同时利用shControl构建对照组稳转细胞株,再分别用Control vector、HIF-1α质粒转染,Western Blot检测shPTBP1、shControl及Control vector、HIF-1α质粒对肾癌细胞中PTBP1、VEGFA及HIF-1α蛋白表达的影响;CCK8实验观察PTBP1基因沉默对于肾癌细胞786-O和ACHN细胞增殖能力的影响;Transwell细胞迁移实验观察PTBP1基因沉默以及HIF-1α质粒过表达对肾癌细胞株786-O和ACHN细胞迁移能力的影响;Transwell细胞侵袭实验观察PTBP1基因沉默以及HIF-1α过表达对肾癌细胞株786-O和ACHN细胞侵袭能力的影响;血管形成实验观察PTBP1基因沉默以及HIF-1α过表达肾癌细胞上清液对HUVECs内皮细胞血管形成能力的影响;通过shPTBP1慢病毒干扰PTBP1基因,从而构建Luc-786-O-shPTBP1和Luc-786-O-shControl稳转细胞株,分别将2种稳转细胞悬液通过裸鼠尾静脉注射,6周后在小动物活体成像系统检测小动物体内转移瘤生长情况。结果:1.肾癌组织芯片免疫组化与临床资料综合统计分析:PTBP1在肾癌组织中的表达率明显高于正常肾组织(P<0.05);PTBP1在肿瘤直径>7cm组中的高表达率显著高于≤7cm组(P<0.001);PTBP1在III、IV期的高表达率显著高于I、II期(P<0.001);PTBP1在有远处转移组的高表达率显著高于无远处转移组(P<0.001);PTBP1的高表达与的5年总生存率(P<0.001)和5年无病生存率(P<0.001)正相关。2.Western Blot显示:与Control组相比,利用shRNA沉默PTBP1后,ACHN和786-O细胞中PTBP1蛋白表达显著降低(P<0.001),VEGFA和HIF-1α蛋白表达降低(P<0.001);再转染HIF-1α质粒后,VEGFA和HIF-1α蛋白表达恢复。3.CCK8细胞增殖实验显示:与Control组相比,利用shRNA沉默PTBP1后,ACHN和786-O细胞的细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。4.迁移实验显示:与Control组相比,利用shRNA沉默PTBP1后,ACHN和786-O细胞的迁移能力明显下降,再转染HIF-1α质粒后,ACHN和786-O细胞的迁移能力恢复。5.侵袭实验显示:与Control组相比,利用shRNA沉默PTBP1后,ACHN和786-O细胞的侵袭能力明显下降,再转染HIF-1α质粒后,ACHN和786-O细胞的侵袭能力恢复。6.血管形成实验结果显示:与Control组相比,利用shRNA沉默PTBP1后,ACHN和786-O细胞的血管形成能力明显下降,再转染HIF-1α质粒后,ACHN和786-O细胞的血管形成能力恢复。7.小动物活体成像系统检测结果显示:与Luc-786-O-shControl组相比,注射Luc-786-O-shPTBP1细胞的小鼠肺转移瘤检测所得荧光值明显减少,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.PTBP1在肾癌组织中高表达,其高表达与肿瘤大小、TNM分期、M分期以及较差的预后呈正相关。2.沉默PTBP1基因表达可以抑制肾癌细胞的增殖和转移能力。3.PTBP1可能通过HIF-1α信号通路调节肾癌细胞的增殖和转移能力。4.在体内实验中,沉默PTBP1能够抑制肾癌细胞肺转移。