<'51>铬示踪法研究UDP-Gal和海藻糖在血小板液态低温储存中的作用

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目的:(1)观察在液态低温保存的血小板中加入尿嘧啶二磷酸半乳糖(UDP-Gal)或海藻糖后,血小板在血液中的寿命或在肝脏中的破坏率的改变,研究UDP-Gal及海藻糖在血小板低温储存中的作用,并观察UDP-Gal及海藻糖与血小板寿命的量效关系;(2)UDP-Gal或海藻糖加入血小板中进行不同时间的储存,观察各储存时间的血小板寿命,即海藻糖UDP-Gal与血小板寿命的时效关系。方法:(1)将21只新西兰大白兔分成七组,每组3只。取心脏血10Ml,制成浓缩血小板(CP),分别按七种不同的条件储存,即常温储存,液态4℃低温储存,液态4℃低温+五种不同浓度UDP-Gal储存24h。用51铬标记血小板后回输入兔体内,计算24、48、72h血小板存活率。于72 h时将兔子处死,解剖,测定肝脏、脾脏、肺脏及血液的放射性计数率;(2)将33只新西兰大白兔分成11组,每组3只。按上述方法制成CP,将实验一中所得出最适浓度的UDP-Gal(5mg·mL-1)加入制备的CP中,混匀,37℃水浴锅中温浴后,从第一组到第十一组分别于4℃冰箱储存24h、2d、4d、6d、8d、9d、10d、11d、12d、13d及14d,用51铬标记血小板后回输入兔体内,计算24、48、72h血小板存活率。于72h时将兔子处死,解剖,测定肝脏、脾脏、肺脏及血液的放射性计数率。(3)按上述方法取心脏血10Ml,制成浓缩血小板(CP),分别按八种不同的条件储存,即常温储存,液态4℃低温储存,液态4℃低温+六种不同浓度海藻糖储存24h。用51铬标记血小板后回输入兔体内,计算24、48、72h血小板存活率;(4)将实验一中所得出最适浓度的海藻糖(50mg·mL-1)加入制备的CP中,混匀,37℃水浴锅中温浴后,从第一组到第十一组分别于4℃冰箱储存24h、2d、4d、6d、8d、9d、10d、11d、12d、13d及14d,用51铬标记血小板后回输入兔体内,计算24、48、72h血小板存活率。结果:(1)4℃储存组血小板各时间段的存活率均明显低于常温储存组,而肝脏放射性活度百分比明显高于常温储存组;血小板中加入各种浓度UDP-Gal 4℃24h储存后血小板存活率明显高于4℃储存组,而肝脏放射性摄取明显低于4℃储存组,并且随着UDP-Gal浓度增加,对血小板的寿命延长越明显,浓度到达5mg·mL-1时,血小板在体内寿命就不再进一步增加,而且此时的血小板存活率甚至高于常温储存组;(2)UDP-Gal加入血小板中液态低温储存12d之内,血小板存活率与UDP-Gal 4℃24h储存组无明显差异,从第十三天开始,UDP-Gal失效,血小板24h存活率下降,在肝脏中的破坏率逐渐增加;(3)血小板加入海藻糖4℃24h储存组血小板存活率明显高于4℃储存组,随着浓度增加,各时间段存活率随之增加,当浓度超过50mg·mL-1时,存活率不再增加,但存活率始终低于常温储存组;(4)海藻糖加入血小板中液态低温储存14d,输入体内后对血小板仍具有良好的保护作用,各时间段存活率未下降。结论:UDP-Gal及海藻糖对液态低温储存的血小板具有良好的保护作用;并且可使血小板在液态低温下进行长时间储存。
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