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苯乙醇胺A (phenylethanolamine A，PEAA)属于β-受体激动剂家族中的苯乙胺类，在畜牧生产中非法添加会对动物和人类的健康造成危害，已被农业部列为禁止在饲料和动物饮水中使用的物质。本研究选用两种免疫分析方法-酶联免疫吸附法（ELISA）和胶体金免疫层析法(CGIA)对苯乙醇胺A的检测方法进行了研究，获得了以下结果：1、采用兰尼镍还原法制备了苯乙醇胺A氨基衍生物(PEAA-NH2)，之后使用重氮化法将PEAA氨基衍生物分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）进行偶联，获得免疫原PEAA-BSA和包被原PEAA-OVA。常规方案免疫Balb/C小鼠后，选择效价好和灵敏度高的2号小鼠进行冲击免疫，无菌条件下取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞（Sp2/0）进行融合，经亚克隆筛选获得3株稳定分泌PEAA抗体的细胞株。以其中效价和灵敏度最好的2H8细胞株小鼠腹腔诱生腹水。2、采用高碘酸钠法制备了酶标抗原PEAA-HRP，以此酶标抗原和PEAA单克隆抗体（2H8）建立了检测PEAA的直接竞争ELISA法。经检测，该方法的IC50值为0.204ng/mL，最低检测限（LOD）为0.022ng/ml，对PEAA和PEAA-NH2有很高的特异性，与莱克多巴胺的交叉反应率很小(CR=8.3%)，与其他15种β-受体激动剂竞争物质没有交叉反应(CR<0.1%)。实际样品试验显示，该方法检测猪肉、猪肝、猪尿和饲料样品的最低检测限分别为0.431，0.455，0.225和8.693ng/mL，最低定量限分别为0.578，0.647，0.360和14.477ng/mL；板内回收率在84%-114%，板间回收率在82%-120%；板间变异系数小于13.33%，板内变异系数小于10.53%。经LC-MS/MS法验证，该方法检测实际样品是可靠的。3、本研究采用柠檬酸钠还原法制备胶体金，获得的胶体金颗粒直径约40nm，PEAA单克隆抗体与胶体金标记的最佳浓度为60μg/mL。该试纸条机读检测灵敏度为0.52±0.11ng/mL，肉眼观察的检测限可达2.7ng/mL，可以在10min内获得结果。该试纸条对PEAA和PEAA-NH2有很高的特异性，与莱克多巴胺的交叉反应率很小（CR=0.52%），与其他10种β-受体激动剂竞争物质没有交叉反应（CR<0.1%）。试纸条检测猪尿样品的最低检测限为0.188ng/mL，最低定量限为0.263ng/mL，批内回收率在92.00%-96.00%，批间回收率在95.00%-102.00%，批间变异系数小于17.65%，批内变异系数小于10.75%。经LC-MS/MS方法验证，该试纸条检测猪尿样品是可靠的。本研究采用杂交瘤细胞技术制备了苯乙醇胺A的单克隆抗体，在此基础上建立了苯乙醇胺A的直接竞争ELISA法，制备了苯乙醇胺A胶体金试纸条，为检测苯乙醇胺A残留提供了快速可靠的免疫检测方法。