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高效液相色谱(HPLC)是化学学科中最重要的分离分析方法。高效液相几乎能够分析所有的有机、高分子、生物样品,已广泛应用于石油化工、生物化学、临床医学、食品卫生、环境监测、医药工业等领域。高效液相色谱法与化学衍生法的结合,对于环境中的多数物质,可以满足由常规及痕量分析向超痕量的分析。新型衍生化试剂的开发和其在高效液相色谱中的应用研究一直是高效液相色谱领域中最为活跃的研究方向之一。本论文重点研究了两种荧光衍生试剂的设计合成和表征,并且考察了衍生试剂的光谱性质,优化了衍生反应条件和色谱分离条件,建立了相应的高效液相色谱分析方法,并应用于多种实际样品的分析。具体工作如下：第一章：简述了高效液相色谱和高液相色谱质谱联用研究进展。介绍了化学衍生法和荧光衍生法的原理与应用。最后列举了近年来广泛应用的荧光衍生试剂。第二章：设计合成了两类新型荧光标记试剂：10-乙基-2-氨基吖啶酮(EAA),2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑(PIA),并对这两种化合物进行了结构表征和光谱性质研究。第三章：荧光标记试剂10-乙基-2-氨基吖啶酮(EAA)用于饱和脂肪酸的高效液相色谱分析,通过对衍生化反应条件和色谱分离条件的优化,建立了饱和脂肪酸的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于奶油、牛奶和几种花粉样品的测定。第四章：荧光标记试剂10-乙基-2-氨基吖啶酮(EAA)和2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑(PIA)用于饱和和不饱和脂肪酸混合物的高效液相色谱-质谱分析,对衍生化反应条件和色谱分离条件进行了优化,并将该方法应用于实际样品的测定。第五章：荧光标记试剂2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑(PIA)和10-乙基-2-氨基吖啶酮(EAA)分别用于脂肪醛和胆汁酸的高效液相色谱分析。并且对衍生化反应条件和色谱分离条件进行了优化,并将该方法应用于相关实际样品的测定,结果表明所建立的方法具有很大的可行性。