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目的:研究5-Fu对结肠癌HCT116细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。观察PDTC对5-Fu诱导HCT116细胞凋亡与NF-κB活化的影响,以及NF-κB活化及抑制的同时uPA表达的动态变化。方法:利用MTT法观察体外不同浓度的化疗药物5-Fu单独应用及5-Fu与抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)两药联合作用48h对结肠癌HCT116细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪Annexin V-FITC法检测5-Fu、PDTC对结肠癌细胞HCT116凋亡诱导作用;采用免疫组织细胞化学方法半定量分析HCT116细胞在5-Fu、PDTC作用前后NF-κB及uPA表达的动态变化。结果:1.MTT实验显示,在作用时间相同的条件下,随着单独应用5-Fu作用浓度的增加,HCT116细胞的增殖抑制作用越明显,存在着浓度依赖性效应关系。与对照组相比较有明显差异,有统计学意义(P＜0.01)。不同浓度的5-Fu分别与浓度为1μmol/L的PDTC联合作用48h,与对照组及单独应用5-Fu组相比较,HCT116细胞的增殖抑制率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.001)。2.流式细胞仪分析显示,1umol/L的PDTC及1umol/L的5-Fu单独作用HCT116细胞12h后,细胞凋亡率与对照组的比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。10、100umol/L的5-Fu单独作用12h,可以诱导HCT116细胞凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),有浓度依赖性。选择5-Fu 10μmol/L为凋亡诱导剂量,PDTC1μmol/L为协同诱导剂量,经PDTC预处理1h后,5-Fu诱导的细胞凋亡率明显增加,与单用5-Fu 10μmol/L组及对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。3.免疫组织细胞化学方法和图像分析显示,HCT116细胞经5-Fu10μmol/L作用24h后NF-κB表达明显增强,活化入核细胞数增多,阳性单位增加,uPA表达明显增强,阳性单位增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);单独用PDTC1μmol/L作用24h后,NF-κB、uPA表达与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而用PDTC1μmol/L预处理1h,再用5-Ful0μmol/L作用24h后,HCT116细胞NF-κB的活化受到明显抑制,表达下降,uPA表达明显降低,与单用5-Fu 10μmol/L组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:1.NF-κB活性抑制剂(PDTC)可以显著增强5-Fu对结肠癌HCT116细胞的生长抑制作用。2.5-Fu诱导结肠癌HCT116细胞凋亡时可以诱导NF-κB活化,同时uPA的表达增加。3.应用NF-κB活性抑制剂(PDTC)可以抑制5-Fu诱导的NF-κB活化,同时能使uPA表达下降。4.应用NF-κB活性抑制剂(PDTC)可以增加HCT116细胞对5-Fu的敏感性使细胞凋亡增加,同时降低uPA表达。